金奈米粒子(b) - 台北科技大学.pptVIP

由於DNA 不像抗體、avidin 等蛋白質可自然地黏著在nitrocellulose 上，所以通常將ssDNA capture probe 先修飾biotin，而後利用bitotin 與avidin 間強親和力固定於test line 上。此兩DNA 探針皆與目標DNA 互補，如果樣本中有目標DNA 存在，則奈米金停留在test line上，故呈紅色。而control line 上的DNA probe 與在金奈米粒子上的DNA probe 互補，所以只要金奈米粒子上DNA probe 仍存在，control line 將呈色。反之controlline 上未呈色，該biosensor 則判定為失效。 以下為近年來DNA-AuNP lateral flow strip biosensors的幾個例子。 Mao 等人使用高專一性的ssDNA 分子信標(molecular beacon) 當作探針並結合金奈米粒子，他們將所設計出來的層流法生物感測器稱之為乾式試劑型的核酸生物分子感應紙碟 (dry-reagent strip-type nucleic　acid biosensor, DSNAB)。 其原理為ssDNA 分子信標之一端修飾硫醇與奈米金鍵結，另一端修飾biotin，此兩端互補形成髮夾形狀之二次結構。若無目標DNA，此分子信標形成髮夾結構，biotin 不會露出，無法與test line上的avidin 結合。若有目標DNA，髮夾結構打開，biotin露出與test line 上的avidin 結合，則奈米金停留在testline 上，故呈紅色。control line 上的DNA probe 與在金奈米粒子上的DNA probe 互補，所以只要金奈米粒子上DNA probe 仍存在，control line 將呈色。 DNA-AuNP lateral flow strip biosensors 的原理 此篇文獻是利用兩個不同大小的奈米金以lateral flow assay 的方法分析 TROPONIN I的濃度，在此篇文獻中作者改良了舊式的LFA的方法，利用了兩個大小不同的奈米金粒子進行實驗 particle conjugate NC membrane absorbent pad test line sample pad control line A dual AuNP conjugate-based LFA method MicroRNA層流法生物感測器 synthetic-miR-21之標準曲線w/o silver enhancement synthetic-miR-21之標準曲線w/o silver enhancement synthetic-miR-21之標準曲線 w/ silver enhancement synthetic-miR-21之標準曲線 w/ silver enhancement He 等人在2011 年所發表的檢測方法利用horseradishperoxidase (HRP) 結合金奈米粒子 (Au-NP) 做為一個超敏感核酸感應器。比在2009 年Mao 等人所發表的檢測方法的偵測極限降低了1000 倍，其偵測極限可達到0.01 pM 。其方法是金奈米粒子上不僅固定ssDNA probe，同時固定了HRP。在目標DNA 與金奈米粒子停留在test line 後，加入3-amino-9-ethylcarbazole和雙氧水，利用HRP 催化反應產生紅色的產物，可達到增強訊號的效果。 Yang 等人使用銀還原技術增強訊號，可使靈敏度增加100 倍。其原理是在樣本已通過test line 及controlline 後，將含有硝酸銀和硝酸銀還原劑的兩個不同的墊子，疊放置於test line 及control line 上，加入水使硝酸銀與硝酸銀還原劑接觸到含有金奈米粒子的檢測線後，金奈米粒子可促進銀的沉積，會使銀沉積在奈米顆粒上呈現黑色，處理後，即使樣品濃度較低者亦可以肉眼觀察出。 因應環境中既存之病原與危害因子，發展更新穎、更靈敏的檢測儀器或方法對於公共衛生、食品安全及環境監測等研究領域已是不可或缺之一環，然此類技術發展大多難以同時兼顧時間、成本與操作便利性等條件。所介紹之金奈米粒子應用層流感測器最大之優點便在於檢測快速、成本低廉、操作簡易不需過多專業訓練或技術人力支援、便於攜帶保存、不需儀器判讀結果等，適合用於檢體大量初步篩選或者point-of-care。 介紹了一系列應用奈米金粒子之層流感測器與優劣探討，但最重要的是裝置產出的品質控制必須恆定，如此其靈敏度、特異性、誤測率、交叉反應等始具有相對的意義。 二十一世紀是生醫產業的時代，感測器的發展依舊必須兼具準