高效液相色谱溶剂系统四面体优化法.pdfVIP

高效液相色谱溶剂系统四面体优化法 吴 文 班允东 邸 欣 潘 萌 孙毓庆 沈（阳药学院 沈阳 110015） 提要 改进了Glajch的三角形法，建立了适合于高效液相色谱(HPLC)的四面体优化法。将7个溶剂系统的实 验结果输入计算机，由计算机模拟231个溶剂系统的色谱行为，优选出最佳溶剂系统。将此法用于12种磺胺药 物的分离，得到了满意的结果。 关键词 高效液相色谱，流动相的优化，四面体优化法，磺胺类药物 W ／2＝A＋BtR 1前言 式中，A,B是与温度、溶质、流动相和固定相有关的 近年来，利用计算机模拟色谱行为进行色谱条 常数。据此可用4σ作峰底，描绘模拟色谱图。 件优化，已成为一个新动向。其中三角形法是 基于以上原理，我们采用BASIC语言，编成了 Glajch[1]在1980年报道的一个对多元流动相体系进 OSSP软件 O（ptimizingSolventSystemProgram ， 行最优化的方法。但研究发现，该法结果不是唯一 四面体法流程图见图1。 解，特别是当组分保留次序发生交错，最难分离对发 生变化时，有可能导致错误的结论。对此，我们建立 了四面体优化法及其软件。通过对12种磺胺药物的 HPLC实验，结果表明本方法准确、方便、形象、直 观 。 2 原理 按Glajch的三角形优化法，设计 7种溶剂系统 进行色谱实验。溶质的色谱行为符合以下基本方 程[2] Ink =α1X1＋ 2X2＋ 3X3＋ 12X1X2 ＋ l3X1X ＋ 23X2X3＋ 123X1X2X3 式中，为色谱特征常数，k为容量因子，X为多元流 动相中等洗脱溶剂的体积分数。 3 实验部分 进行优化时，必须有一个能反映色谱分离质量 的目标函数，我们采用以下优化函数： 仪器：Hitachi655-15型液相色谱仪，UV655型 COF＝∑i＋n 可变波长紫外检测器655-60型微处理机，SUN386 R＞1 时，n鹡n＋1 微机。 R＞1.5时，R＝1.5 色谱条件：色谱柱为ODS,250×4.6mmi.d., 流速1mL/min；检测波长为265nm。 其中，Ri为i对峰的分离度n为基本分离开(R＞1) 样品：醋酸磺胺米隆，磺胺米隆，TMP,SG，丙磺 的峰数。 舒，SN,SD,SM2，消炎磺，周效磺胺SMZ及邻甲苯 为了防止单个峰对优化函数的偏重影响，当R 磺酰胺，样品均溶于95％乙醇中。 ＞1.5时，令R=1.5。为了使其适用于对未知样品 的分析，增加了n项，使其产生尽可能多的分离峰。 4 结果与讨论 在液相色谱中，溶质半峰宽 W1/与其保留值tR 4.1测定溶剂系统最佳洗脱强度 间存在下列线性关系[3] 本文收稿日期：1993年10月2 日，修回日期：1994年1月2日 选择合适的溶剂系统洗脱强度，使样品中各组 留时间表以及模拟色谱图 见（图4。 分的k值尽可能多地落在最适宜范围(2～?5)内，为 溶剂系统组分选择作准备。以甲醇、水为初试溶剂， 调配甲醇 ：水＝20：80溶剂强度S=O.6最合适。 4.2 确定溶剂四面体上的等洗脱平面 在反相HPLC中，溶剂四面体以水为底剂，甲 醇、乙