番茄和油菜内生菌的分离、筛选及对植物病原菌拮抗活性研究.pdfVIP

番茄和油蕖内生菌的分离、筛选 及对植物病原菌拮抗活性研究 摘要 本文对山西太谷、运城等地区采集的番茄和油粱生长期健康械株进行了 内至蓠的分离和菇抗病原真菌的乎扳筛选，内生细篱对番茄促生诈用筛选， 以及对拮抗性较强的菌株进行了代谢产物活性测定和菌株撩定，并对灰霉病 菌搪杭机理遂行了劾步研究。 1．从番茄和油菜体内共分离到95株细簿，23椿真菌和8株放线菌，并 对内生蓠选行了辖拣病原真篱平板筛选。鳍果表明：番茄和油菜钵内均以细 菌分离种数教多，真茵次之，放线蘸最少。不同番茄品种体内分离的内生麓 释数宥差剐。植抹不同部位内生菌分离稀数也不同，茎部分离真蓠种数高于 根部，而分离细菌种数少于根部。 通过对肉生菌转抗病原真菌乎板筛选，筛选出一批对辆原真菌搪抗挂较 强的内生菌。内生细茵fql2和yc8两菌株对6种病原真菌均有较强的拮抗活 性，尤以对灰霉病菌和菌核病菌辖抗活性最强。内生真菌fq72菌株对灰霉病 菌和蓠核病菌产生较宽抑茸带，表现出强烈的抑制作用。内生放线越株时6 种病原菌辖抗活性较小。 2．拮抗内生菌代谢产物活性测定表明，fql2和yc8两麓株发酵液高温处 理磨均对灰露病菌和菌核骟菊产生强烈的抑制作用，对其宝4种病茵也产斑 一定的抑制作用。fq72菌株培养滤液对灰霉病菌和蓠核病蘸有强烈的拮抗海 栏，其培养滤液高温处理詹抑菌活性不丧炙。内生细菌对番茄幼苗促生测定 结幕表明，所分离的大部分细菌对番茄稽子萌芽及根芽生长无抑制作用，部 分菌株显示出对番茄幼苗具有显著的促生效果。fq65、fq29两细菌能显著提 高番茄种子出苗率、促进生长，增加幼苗鲜重和于燕。 3．番茄体内生真菌鉴定结果表明，所分离的肉虎真菌倪l袜为酵母茵， 属于予囊菌亚门，冀余均为半知菌渡门，以丛梗孢弭菌株数最多。枯抗细蕊 ．1． 鉴定结果表明，fql2、yc8和fq25分属于假单胞茵属、芽孢杆菌属和葡萄球 菌属，其余均属于肠杆茵科。 4．fql2和yc8对灰霉病菌拮抗机理的初步研究表明，fql2和yc8对灰霉 病菌产生较大的抑茵圈。镜检抑菌边缘处，菌丝畸形、断裂，不能正常生长。 两菌株发酵液均能明显抑制灰霉病菌孢子萌发和芽管生长，且在离体黄瓜片 上能较好地抑制灰霉病菌，fql2茵体与其发酵液抑制灰霉病菌效果相当，其 高温发酵液抑菌效果不明显，而yc8菌体和发酵液及其高温处理后发酵液均 能较好地抑制病菌生长。两菌株均能在番茄体内定殖。活体番茄幼苗上抑制 灰霉病菌结果表明，两菌株对灰霉病菌表现一定的预防作用。 关键词：番茄 油菜 内生菌 筛选 拮抗作用 促生作用 鉴定 代谢产物 一2． 月|J 若 1概述 在植物的生态环境中，存在着各种各样的微生物，它们有的附着于植物 的表面，有的则生活在植物体内。对于植物根际和表面附着的微生物研究较 多，而对植物体内的微生物，过去只注重固氮菌、病原微生物和菌根真菌， 而对健康植株体内的微生物——植物内生菌注意较少…1。自20世纪30年代， 由于牲畜食用了感染内生真菌的牧草而造成畜牧业重大损失，内生菌的研究 才得以深入开展起来…1。现有资料表明，植物内生菌几乎存在于所有目前已 研究过的植物中，分布广，种类多。在内生菌——植物宿主——食草动物生 态系统中，植物内生菌扮演着前所未知的重要生态学作用。内生菌产生丰富 多样的次生代谢产物，具有多种生物活性，在农业和医药业中具有重要的应 用潜力“…。因此，利用有益的内生微生物，研究植物与内生微生物的相互作 用具有重要的理论意义和实用价值。当前对植物内生菌的研究已成为国内外 研究的热门课题，植物内生真菌的报道最多，细菌方面也很活跃，但内生放 线菌的研究报道却很少。关于植物内生菌和内生关系的定义和用法较为混乱， 目前在学术界仍有很多争论和分歧。从生物资源利用的角度考虑，多数学者 使用目前较常用的宽广实用性概念，植物内生菌是指那些在其生活史的一定 阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的微生物…3。 2植物内生菌的研究概况及进展 2．1植物内生真菌研究进展 temu]entumL．种子内分离出第一株内生真菌至今已有一百多年的历史，但有 关内生真菌的