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白茅根多糖的提取与含量测定论文.doc
白茅根多糖的提取与含量测定论文
.freelize the extracting conditions of polysaccharide from Imperata Cylindrica and establish a suitable method for its content determination. Methods Based on the qualitative yield of polysaccharide extraction, a orthogonal test ployed to evaluate the effect of four factors including extracting temperature, extracting time, the extraction times and the ratio of material to liquid. The phenol-dense sulphuric acid method ination of polysaccharide. Results The times of extraction and the extracting temperature influenced the content of polysaccharides mostly, ount of um extraction condition es at 85 ℃ for 3 hours,.freele. The contents of polysaccharide in Imperata Cylindrica collected from tperata Cylindrica;polysaccharide;orthogonal design;phenol-dense sulphuric acid method;content determination
白茅根Imperata Cylindrica (L.) Beauv. var. major (Nees) C. E. Hubb.为禾本科植物白茅的根茎,具有凉血止血、清热利尿的功效,临床主要用于治疗急性肾炎、急性传染性肝炎等1。白茅根的成分以三萜类化合物为主,含有葡萄糖、少量果糖和木糖等。白茅根具有极大的药用与食用价值,而多糖为其最主要的成分之一。已有实验表明,白茅根多糖具有明显提高小鼠耐缺氧能力2。白茅根味道甘甜,口感醇厚,国内很多地方都有咀嚼、食用的习惯,是难得的食品添加剂,工业上可作为优良的清热、消暑饮料的原料3-4。实验表明,白茅根毒性小,食用比较安全,小鼠LD50高达20 g/kg以上5。然而,目前白茅根潜在的市场价值还远没有开发出来。我们以白茅根多糖含量为考察指标,用苯酚-硫酸法进行含量测定,考察料液比、提取温度、提取时间、提取次数等因素,确定提取多糖的最佳工艺条件。同时,比较河北安国和安徽亳州两产地的白茅根中的多糖含量,为进一步的市场开发利用提供理论基础。
1 仪器与试药
台式高速离心机(LG10-24A北京医用离心机)、电热恒温鼓风干燥箱(DHG-9070上海三发科学仪器)、HJ-3控温磁力搅拌器(江苏金城国胜实验仪器)、电子天平(AK1140奥豪斯仪器)、TU-1901双光束紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器)、HH-2数显恒温水浴锅(国华电气)、FD-1D-50冷冻干燥机(北京博医康实验仪器)。
白茅根产地为亳州和安国,购于亳州中药材市场,由安徽科技学院时维静教授鉴定。葡萄糖对照品(分析纯,国药集团,批号。
2 方法
2.1 对照品溶液的制备
精确称取干燥至恒重的葡萄糖0.250 g,用重蒸水定容至250 mL,配成质量浓度为1.0 mg/mL的储备液。
2.2 苯酚精制及配制
称取苯酚100 g,加铝片0.1 g与碳酸氢钠0.05 g,蒸馏收集182 ℃馏分,吸取此馏分5 mL,加水至100 mL,置棕色瓶中,即得。
2.3 白茅根多糖的提取
2.3.1 前处理 称取350 g白茅根粉末,加适量石油醚(60~90 ℃)回流2次,每次1 h,倒出石油醚,烘箱中60 ℃烘干,用80%乙醇回流提取2次,每次1.5 h。处理后的药材粉末在烘箱中60 ℃烘干。
2.3.2 水提取粗多糖 称取前处理后的药材10 g,置于250 mL圆底烧瓶中,按照正交表所列出的工艺条件在水浴锅中回流提取。过滤,合并每次试验的提取液,浓缩至10 mL左右,加4倍量的95%乙醇醇沉,静置24 h,得沉淀部分。沉淀用适量无水乙醇、乙醚、丙酮依次洗涤,干燥,得粗多糖。每组样品平行3次。
2.3.3 后处理(纯化粗多糖) Sevag法去蛋白:用5 mL水溶解粗多糖,加入氯仿-正丁
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