质谱技术在核酸研究领域的应用.PDFVIP

中国科学: 化学 2014 年 第44 卷 第5 期: 771 ~ 776 SCIENTIA SINICA Chimica SCIENCE CHINA PRESS 评 述 质谱分析专刊 质谱技术在核酸研究领域的应用 周江* 北京分子科学国家实验室; 北京大学分析测试中心; 北京大学化学与分子工程学院, 北京 100871 *通讯作者, E-mail: zhoujiang@ 收稿日期: 2014-01-19; 接受日期: 2014-02-19; 网络版发表日期: 2014-03-31 doi: 10.1360/N032014-00037 摘要 质谱技术具有快速、准确、灵敏度高等优点, 近年来在生物分析方面得到了广泛的应用. 关键词 核酸作为生命的基本物质, 一直是生命领域的研究热点, 进展日新月异. 而质谱方法也成为了科学 质谱 核酸 家研究核酸的强有力工具, 具有广阔的发展前景. 本文介绍了核酸检测的质谱技术, 并简要综述了 应用 质谱在核酸的高级结构研究、与小分子相互作用、DNA 损伤与修饰等领域的应用, 重点介绍了中 国学者的研究成果. 1 引言 了简要综述. 核酸是生命的最基本物质之一, 对生物体的生 2 核酸检测的质谱技术 长、发育、繁殖、遗传及变异等重大生命现象起着至 关重要的作用[1, 2]. 现代生物技术发现, 大部分的生 2.1 核酸样品的前处理技术 理或疾病性状, 都是由一系列存在于核酸序列上的 与蛋白和多肽样品的质谱分析相比, 核酸样品 基因调控而表现出来的, 因此目前在抗肿瘤、抗病毒 的质谱检测存在一定的难点：其结构中含有大量的带 领域, 核酸是最具发展潜力和最有可能获得重大突 负电荷的磷酸根基团, 容易与钾、钠等正电荷离子复 破的研究对象. 合, 造成加合峰过多形成峰包, 离子化效率不高, 给 [3] 20 世纪 80 年代末以来, 电喷雾电离源(ESI) 和 质谱检测带来困难[8], 因此对于样品的前处理要求较 基质辅助激光解吸电离源(MALDI)[4, 5] 的发明, 使得 高. 研究人员在这方面投入了相当大的精力找出了 分子量上万乃至几十万的生物大分子质谱检测成为 多种核酸的纯化方法, 常见的应用于核酸质谱分析 可能, 为质谱技术引入生物研究领域奠定了基础. 相 的方法有微量透析法(Microdialysis)[9] 、阳离子交换 比于其他检测技术而言, 质谱法具有快速、准确、灵 法[10] [11] [12, 13] 、乙醇沉淀 、ZipTips-C18 反相纯化法 、 敏度高、耗样量少、化学专一性高(可直接分析复杂 磁珠分离法[14] [10] 、尺寸排阻色