实验五 检疫性害虫的检验.ppt

植物检疫技术实验 2011.4.12 实验五 检疫性害虫的检验 实验目的：熟练应用室内检疫检验常用仪器，掌握检验检疫性害虫的实验操作。 实验内容：针对不同供试检疫对象，选择解剖法、染色法、比重法等对检疫性害虫进行检验。 一、解剖检验 借助刀具剖开待检物品，检查是否有害虫存在。 适用范围：有明显被害状、食痕或有可疑症状的种子、果实及其它植物产品，如食心虫、实蝇类危害的果实；天牛、吉丁虫为害的枝干等。 用具与步骤 采用解剖刀、水果刀或剪刀。 在检验中若发现有害虫的产卵孔、蛀孔、虫粪、分泌物等危害迹象时，需利用本方法进一步找到虫体。 二、加热分离检验 原理：利用害虫在受热时苏醒或变得活泼的特点。螨类检验中，利用活螨避光，怕热的习性，加热分离之。 适用范围：多在冷凉季节或气温较低时 用具与步骤：将样品（粮谷、豆粒等）放入磁盘或培养皿中，放在灯光或其它热源上加热，一些蛾类、小型昆虫或迟钝不动的昆虫受热后即爬动而被分离出来。 应用举例 螨类的分离 1.烤螨法 将供试品放在特制的分离器或附有孔径大小适宜的筛网的普通玻璃漏斗里，在漏斗的广口上约6 cm处用一个60～100W的灯泡照射1～2 h。活螨可沿漏斗的底部细颈内壁下爬，漏斗下口处用小烧杯装半杯甘油水收集。 2.热水漂浮法 将原糖样品置于锥形瓶中，温水（30～35℃）溶解，溶液量以刚好不溢出为宜，15～30min后，用载玻片沾取水面漂浮物，镜检观察是否有螨类爬出。 三、比重检验 根据有害籽粒和正常籽粒比重不同，用盐溶液漂检分离的方法。 适用范围 通常用于检查粮谷、谷类中的害虫 。 2. 试剂与操作步骤 ①将试剂（如氯化钠、硝酸铁、硝酸铵等）根据需要配成不同浓度的溶液； ②将过筛后的样品倒入溶液并充分搅拌1min后静止1min，则健粒下沉、被害粒上浮； ③捞出上浮样品，进一步检验。 试剂和溶液浓度的选择主要考虑样品的比重。如检查谷象、米象为害的粮谷籽粒时，选用2％的硝酸铁溶液；检查豆粒等的种子，可用饱和食盐水；检查松籽中是否携带落叶松种子小蜂，用清水即可。 四、染色检验 利用某些植物或器官被害虫为害后，经特殊的化学品处理后，可染上特有的颜色，以帮助检验害虫或判断害虫成活与否的方法。 根据染色剂的不同，可分为高锰酸钾染色法、品红染色法、碘或碘化钾染色法和油脂浸润法。各种方法各有其一定的应用范围。 1. 高锰酸钾染色法 （1）试剂 1%高锰酸钾溶液、硫酸和过氧化氢混合液（1%硫酸100 ml加3%过氧化氢液1 ml）与清水。 （2）步骤 将15g粮粒样品放入30℃温水中浸１min； 然后转移到1%高锰酸钾液内染色１min； 清水漂洗； 滤纸吸干多余液体并镜检，将出现直径0.5 mm黑斑点的籽粒 挑出剖检。 染色后转入硫酸和过氧化氢混合液内处理30 s，则米象的产卵处染成褐色斑点。 （3）适用范围 检验粮粒中的谷象、米象等。 2. 品红染色法 主要试剂：酸性品红溶液（蒸馏水95ml，冰醋酸5ml，酸性品红0.05g） 步骤：取样品15g，30℃温水预浸1min后移入品红液中染色25min，之后取出并用清水洗净，倒在白色吸水纸上，镜检，凡有0.5mm左右樱桃红小点，即为被害粒。 适用范围：同高锰酸钾法，但也适用于植物叶片中斑潜蝇卵的检验。 3. 碘染色法 （1）试剂 1％碘化钾或2％碘酒溶液、0.5％氢氧化钾(钠)溶液。 （2）步骤 取代表样品50 g，放入纱网或包于纱布袋中，浸入配好的碘液中染色l～1.5 min； 氢氧化钾溶液固定30 s； 清水漂洗15～20 s，之后镜检。凡豆粒表面有l～2 mm直径的黑色圆斑者，即为虫蛀粒，再进行剖检。 （3）适用范围 适于被豆象类蛀害的豆粒检验。 （七）软X光透视检验 软X光透视和摄影检验种子，首先由瑞典皇家林学院Simak、Kamra等人创造并提出。 原理：利用软X光波长较长（大于0.01nm），能级较低，穿透力较弱，被检验的物体吸收率高，成像对比度强、层次清晰的特点，对种子进行透视、摄影，以判断种子、苗木及其他植物组织内钻蛀性害虫的发生情况。 1.仪器与操作方法 一般用Hy-35型农用软Ｘ光机。 操作方法：取样品100粒，单层平铺在仪器内样品台上，开通电源，调节光强度和清晰度，通过观察窗，即可在荧屏上观察。凡健康种子，全粒均匀透明；凡有阴影斑点（块），即为虫蛀粒、空壳或内部有虫体。 荧光屏直接观察对桧、杉、粟等小粒种子不适用，必须通过摄影、冲洗出底片才能正确检测。 2.应用举例 松籽中落叶松种子小蜂的检验 软Ｘ光摄影检验　事先把２号或３号放大纸在暗室用黑纸包好，把种子检验样品放在放大纸具有药膜的那一面，置于Ｘ光机载物台上拍摄。 软Ｘ光照片判别　种皮内颜色均为暗色者为空粒种子，种皮、