江西省余江县2016高考生物一轮复习 细胞工程课件.pptVIP

比较 有关概念 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 二、单克隆抗体 4、单克隆抗体的应用 结合同位素的单抗 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠腹腔 体外培养 3、单克隆抗体的制备过程 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。 杂交瘤细胞有何特点？ 特异性强，灵敏度高 单克隆抗体制备过程 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养基 杂交瘤细胞（ B-瘤细胞） 克隆化培养 抗体检测 产生所需抗体的杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 小结 培养液 腹水 (4) 设白菜细胞中的染色体数目为M，甘蓝细胞中的染色体数目为N，则获得的“白菜—甘蓝”染色体数应该是_______ (5) 如利用白菜根尖分生区细胞培育成一棵白菜，该白菜叶片是否具有叶绿体？_____ 。 (6) 对上述培育过程说法不正确的是(多选) A．图示“白菜—甘蓝”植株不能产生种子 B．愈伤组织的代谢类型一定是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株具有白菜和甘蓝的遗传特性 M＋N 　　　ABC 是 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 （一）概念 是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 （二）原理 细胞分裂增殖 一、动物细胞培养 （三）动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 10代细胞 50细胞 剪碎 胰蛋白酶 洗涤、稀释、分离 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，繁殖能力越强，越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢，核型可能变化 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 贴壁生长 接触抑制 10代以内，保持正常二倍体核型 传代培养 无限传代 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 　　细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 原代培养和传代培养、细胞株和细胞系 多数组织细胞固定在表面生长和分裂。 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 1、无菌、无毒的环境 保证细胞顺利的生长增殖 添加一定量的抗生素，定期更换培养液 添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 （四）动物细胞培养的条件 2、营养 3、温度和PH 培养室中控制,使之达到 36.5 ± 0.5℃, 7.2~7.4 培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、气体环境： （五）动物细胞培养技术的应用 （3）细胞的生理、药理、病理研究 （1） 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 （2） 基因工程的受体细胞 植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的 细胞 培养基特有成分 葡萄糖、 培养结果 植物体 培养目的 快速繁殖、培育无病毒植株 获得 培养基性质 固体培养基 液体培养基 全能性 增殖 蔗糖 动物血清 细胞株、细胞系 细胞,某些蛋白质 植物激素 比较项目 原理 培养基区别