西瓜果腐病种子带菌的PCR检测研究.pdfVIP

第26卷 第12期 2007年12月 种 子 (Seed) Vo1．26 No．12 Dec． 2007 西瓜果腐病种子带菌的PCR检测研究 宋顺华。郑晓鹰，李丽 (北京市蔬菜研究中心，北京100089) 摘要：基于传统的PCR检测技术，研究了西瓜果腐病种子带茵的PCR检测方法。结果表明，磷酸缓冲液更适合于作为带 菌种子的浸提液，PVPP可去除种子残留物，提高检测的灵敏度。使用本检测方法，摇培时间在2 h以上时，其时间的长 短不影响自然感染带菌种子的检测；能检测到的西瓜种子最低带茵率为1‰，即1 000粒种子中存在1粒带茵的种子；而 且能对自然感染的单粒种子进行检测，得到种子样品带茵率的数据。本研究所获得的检测方法简便实用，能有效应用于 西瓜商品种子西瓜果腐病菌的检测。 关键词：西瓜果腐病；种子带菌；PCR检测 中图分类号：$651 文献标志吗：A 文章编号：1001-4705(2007)12-0024-04 Detection of Acidovorax avenae subsp．citrulli in Watermelon Seed Using Ploymerase Chain Reaction SONG Shun-hua，ZHENG Xiao-ying，LI Li (Beijing Vegetable Research Center，Beijing 100089，China) Abstract：Based on the classical PCR technique，the testing method for detection ofAcidovorax avenae subsp． citrull in watermelon seed has been reported here．It was shown that PBS was more suitable to extract bacteri— al from watermelon seeds and PVPP could dispose of seed residue and improve the testing sensitivity．The time did not influence results of testing for watermelon seeds infected by nature when it iS over 2 hours．The testing sensitivity can reach 1％D of infected seeds．namely there was 1 infected seed in 1 000 seeds．1 infected seed can be tested and the data of infected seeds percent can be got with this meth0d．1’his demonstrate that the method in this study iS simple and practicable and can be used to detection Aae in watermelon seeds． Key words： Acidovorax avenae subsp．citrulli；bacterial seed；PCR detection 细菌性果腐病(Bacteiral Fruit Blotch，简称BFB) 发展，国外关于该病害基于PCR检测技术的报道很 是一种严重危害葫芦科作物的病害，尤其以危害 多 ，传统的PCR技术所使用的PCR模板是采用 西¨ j、甜瓜为重，给西、甜瓜生产造成了很大的危害。 CTAB的方法从带菌种子上分离细菌DNA j，此方法 1988年首次在美国发现该病…，目前已经扩展到美国 比较繁琐，也降低了PCR的灵敏度。将免疫磁分离与 东南部的