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细胞分裂素对小麦幼苗生长相关酶活性影响摘要：利用细胞分裂素处理小麦幼苗叶片，测量了小麦超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果表明，浓度为５ ｍｇ／Ｌ细胞分裂素可以提高矮秆小麦的ＳＯＤ、ＰＯＤ活性，降低ＭＤＡ的含量，有助于小麦的生长，延缓衰老 关键词：小麦；细胞分裂素；超氧化物歧化酶；过氧化氢酶；过氧化物酶；丙二醛 中图分类号：Ｓ５１２．１０１ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０11）24－5044-02 Ｔｈｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ｏｎ Ｇｒｏｗｔｈ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｅｎｚｙｍｅｓ ｏｆ Ｗｈｅａｔ Ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ WU Juan-juan （Medicine School of Nantong University， Nantong 226001，Jiangsu，China） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｌｅａｆ ｏｆ ｗｈｅａｔ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ， ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＳＯＤ， ＣＡＴ， ＰＯＤ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ of ＭＤＡ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ５ ｍｇ／Ｌ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ｉncreased ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＳＯＤ， ＰＯＤ，ＣＴＡ ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＭＤＡ． ５ ｍｇ／Ｌ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ could ｐｒｏｍｏｔｅ ｗｈｅａｔ ｇｒｏｗｔｈ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｗｈｅａｔ； ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ； SOD； CAT； POD； ＭＤＡ 细胞分裂素是一类促进细胞分裂的植物激素，在生理活性上表现促进细胞分裂和伸长、诱导愈伤组织分化和气孔张开，对植物的生长发育和一些生理过程都有很大的作用［１，２］。近年来，细胞分裂素在农业上的应用越来越广泛，ＣＴＫ类植物生长调节剂在农业生产中得到了广泛的应用［３］。喷施细胞分裂素会导致影响植株生长的多种生理生化指标产生变化，如抗氧化酶类活性变化，丙二醛含量的变化［４］。通过喷施同一浓度细胞分裂素，测定不同喷施时间下的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化，初步分析了细胞分裂素在小麦体内的作用，旨在探讨其对小麦生长的影响 １ 材料与方法 １．１ 材料 供试材料为小麦矮化突变体ＤＹ １．２ 方法 １．２．１ 材料培养及处理 取小麦材料ＤＹ置于大的培养皿中，加入适量的水（以水刚好没过种子颗粒为宜），浸泡2 d，待大多数种子萌发后，选择颗粒饱满、萌发良好的种子，置于各个小的培养皿中培养。在小的培养皿中，铺设折叠的纱布（将长２５ ｃｍ、宽８ ｃｍ的纱布折叠５层），将小麦种子均匀放入培养皿中，呈同心圆状（每个小的培养皿中放颗粒２５～３０粒），每颗小麦种子的萌发方向均指向圆心方向。加入适量的自来水（水以刚好没过种子颗粒为宜），在同等条件下进行培养。到叶片刚长出时，进行下步试验 用５ ｍｇ／Ｌ浓度的细胞分裂素对ＤＹ的叶片进行喷施，每次每株定量喷施１～２ ｍＬ，每天喷施两次，共进行１０ ｄ，每隔一天取叶片。取样时，每次均取相应的对照样品，分开保存于低温冰箱中，用于不同生理生化指标的测定 １．２．２ 酶液提取 不同取样时间试验组和对照组均称取０．８ ｇ小麦叶片，加少量碳酸钙粉末和１０ ｍＬ磷酸缓冲液研磨，匀浆后，４ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心２０ ｍｉｎ，取上清液，分装在刻度为１．５ ｍＬ的小管中，每组分装５管，低温保存，待用 １．２．３ 生理指标测定 ＳＯＤ活性测定：采用氮蓝四唑（ＮＢＴ）光化还原法［５］，测定样品在５６０ ｎｍ处的吸光度，以抑制ＮＢＴ光化还原的５０％为一个酶活单位，ＳＯＤ比活性＝［（ＯＤｍａｘ－ＯＤ５６０ｎｍ）／ＯＤｍａｘ］／０．５／蛋白质量，计算酶活性，以Ｕ／ｍｇ表示；ＣＡＴ活性测定：向各管中加入１ ｍＬ Ｈ２Ｏ２（０．２％）、２ ｍＬ Ｈ２Ｏ，１０ μＬ酶提取液，启动反应，分光光度计测４７０ ｎｍ处ＯＤ值，每隔1 min记录1次，记录４次，计算出平均每分钟ＯＤ值的降低量。根据蛋白质浓度计算蛋白质量，根据酶的活性单位计算酶的比活性，以Ｕ／ｍｇ表示；ＰＯＤ活性测定：采用愈创木酚法［６］，测定４７９ ｎｍ下ＯＤ值，ＰＯＤ比活性 ＝酶活性／蛋白质量；丙二醛（ＭＤＡ）含量测定：采用ＮＢＴ光化还原法，取样品溶液３００ μＬ于试管中，加入４．０ ｍＬ ＴＢＡ（０．５％）溶液，混合后于沸水浴中反应２０ ｍｉ