槲皮素烃基化衍生物的合成及其促犕犆犉7细胞-第二军医大学学报.PDF

第二军医大学学报 年 月第 卷（增刊） ２０１４ １０ ３５ ， ， （ ） · · ＡｃａｄｅｍｉｃＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒ ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔ Ｏｃｔ．２０１４Ｖｏｌ．３５Ｓｕ ｌ ８３ ｙ ｙ ｐｐ 犛５ 药材，药化，有机化学 　 犃犛５１ 槲皮素烃基化衍生物的合成及其促 犕犆犉７细胞凋亡作用的研 究 １ ２ １ １ 瞿 娇 ，栗境铎 ，刘 姿 ，孙耀庭 ；指导教师：甄宇红 　 　 １．大连医科大学 ２０１１级临床药学 ２．大连医科大学 ２０１１级医学影像学 目的】 槲皮素具有一定的抗肿瘤活性并且毒性较低，具有良好的应用前景，但因溶解性差，不易吸收，影响 　　 　 了其开发和利用。本研究以槲皮素为原料，合成一系列烃基化衍生物，并考察这些衍生物对人乳腺癌细胞 ＭＣＦ７ 的促凋亡作用及可能的机制。 １ 方法】 将槲皮素进行乙酰化保护，在乙腈中以不同试剂烃基化，产物经重结晶和柱层析法纯化，以 ＭＳ、 　 　　 　 １３ 、 、 进行产物分子量测定及结构表征。测定各产物在 培养基中的溶解度，选取溶解 ＨＮＭＲ ＣＮＭＲＮＯＥＳＹ ＤＭＥＭ 　　 　 　　　 　 　　　 　 度较好的产物，以ＭＴＴ法测定其对 ＭＣＦ７细胞增殖率的影响，以 ＨＰＬＣ法测定其在 ＭＣＦ７细胞中浓度随时间 的变化。选取 较小的产物，分别以 双染 流式细胞术、 染色、 片段化分析考察其对 ＩＣ５０ ＡＶＰＩ  ＤＡＰＩ ＤＮＡ ＭＣＦ７ 细胞的促凋亡作用。分别经 ＤＣＦＨＤＡ染色和ＪＣ１染色测定衍生物对 ＭＣＦ７细胞中ＲＯＳ生成量及线粒体膜电 位的影响， 法测定 清除剂 乙酰半胱氨酸及广谱 抑制剂 对衍生物促凋亡作用的 ＭＴＴ ＲＯＳ Ｎ ｃａｓａｓｅ ＺＶＡＤＦＭＫ ｐ 影响，以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白在 ＭＣＦ７细胞中的表达。 结果】 对槲皮素烃基化得到了 种衍生物，其中， 丁基槲皮素（ ）和 香叶基槲皮素（ ）在 ７ ７Ｏ ＢＱ ７Ｏ ＧＱ 　 中的溶解度均大于 ／ ，对 细胞的 分别为（ ） ／ 、（ ） ／ ＤＭＥＭ １００ ｍｏｌＬ ＭＣＦ７ ＩＣ５０ ２２．６±２．２ ｍｏｌＬ ４３．５±２．１ ｍｏｌ μ μ μ 。 及 在 细胞中的蓄积浓度比高于槲皮素数倍，且在细胞中停留的时间更长，对 的促凋亡 Ｌ ＢＱ ＧＱ ＭＣＦ７ ＭＣＦ７ 作用明显强于槲皮素。作用机制研究表明， 及 对 细胞的促凋亡作用是由