乌苯美司联合高三尖杉酯碱对急性粒细胞白血病(M1)细胞增殖与凋亡的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 目的： 探讨不同浓度乌苯美司（Ubenimex ）、高三尖杉酯碱（Homoharringtonine, HHT ）及两药联合对急性粒细胞白血病（M1 ）细胞增殖和凋亡的影响。 方法： 不同浓度的乌苯美司（Ube ）、高三尖杉酯碱（HHT ）及两药联合作用于急 性粒细胞白血病（M1 ）细胞 24h 、48h 、72h，CCK-8 法分别检测急性粒细胞白 血病（M1 ）细胞的生长抑制率。以乌苯美司（1.0μg ／ml ）、高三尖杉酯碱 （0.01μg ／ml ）、两药联合为实验组，未加药物为对照组，培养 48h 后，观察细 胞形态变化；流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞表面分化抗原 CD13 的表达 率；半定量 PCR 技术检测各组细胞 C-myc 基因 mRNA 的表达水平。 结果： 1、0.001μg ／ml 、0.005μg ／ml 、0.01μg ／ml 、0.05μg ／ml 、0.1μg ／ml ，5 个浓度梯度的 HHT 分别作用于 AML-M1 细胞 48h ，抑制率分别为 （13.75±3.01 ）% ，（17.61±3.22 ）% ， （35.07±5.91 ）% ，（77.62±4.54 ）% ， （84.51±7.63 ）%，(P0.05)，通过加权直线回归法计算可知 HHT48h 半数抑制 浓度(IC50)值为 0.0398μg ／ml ，选取 0.01μg ／ml HHT 作为单药实验浓度； Ube 0.01μg ／ml 、0.1μg ／ml 、1.0μg ／ml 、10μg ／ml 、100μg ／ml 处理 48h 抑制率分别为（ 18.85±1.54 ）% ，（27.52±1.87 ）% ， （36.09±2.79 ）% ， （69.32±4.21 ）%，（80.59±5.32 ）%，(P0.05)，Ube 对 AML-M1 的抑制作用呈 浓度依赖性，加权直线回归法计算可知 Ube 48h IC50 值为 5.510μg ／ml ，选取 1.0μg ／ml Ube 作为实验浓度； 2 、AML-M1 细胞与 Ube （1.0μg ／ml ）共培养 48h 后，细胞形态发生了明 显变化，可见细胞皱缩、不规则等变化； 3、AML-M1 细胞经 Ube 不同作用时间处理后，出现不同程度的抑制，随 着浓度（0.01μg ／ml 、0.1μg ／ml 、1.0μg ／ml 、10μg ／ml 、100μg ／ml ）增加， 抑制率分别为 24h （3.42±0.76 ）% ，（10.69±1.63 ）% ， （18.92±2.13 ）% ， （36.81±3.73 ）% ，（66.94±7.84 ）%(P0.05) ，48 小时抑制率为（15.16±2.46） % ，（28.61±2.09 ）% ， （40.76±2.36 ）% ，（62.35±4.87 ）% ，（74.74±7.87 ）% ， II 万方数据 摘要 (P0.05)，72 小时抑制率为（28.35±2.87 ）% ，（35.95±2.65 ）% ，（45.94±3.56 ） % （71.05±4.76 ）% ，（90.07±7.93 ）% ，(P0.05) ，抑制作用逐渐增强，并呈时 间依赖性,与对照组相比，Ube 对 AML-M1 细胞产生了明显的抑制作用； 经上述 5 个浓度梯度 Ube 联合 HHT