二甲双胍对人肝癌细胞HepG2增殖及REDD1、cyclinD1表达的影响.pdfVIP

摘要 摘 要 目的：探讨二甲双胍作用于人肝癌 HepG2 细胞后，对人肝癌细胞 HepG2 增殖以及对REDD1 、cyclinD1 表达变化的影响。 方法：以不同浓度（0.0、2.5 、5.0、10.0mmol/L ）二甲双胍处理 HepG2 细 胞，即实验按上述不同二甲双胍浓度共分四组。分别用四甲基偶氮唑盐酶反应 比色法（MTT ）和流式细胞仪检测各组细胞的增殖活性和细胞周期变化。并用 逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR ）检测细胞中 REDD1 、cyclinD1 基因 mRNA 的表达量，用蛋白印迹法（western blot ）检测细胞中REDD1 、cyclinD1 基因的 蛋白的表达量。 结果：二甲双胍作用细胞 48 小时后，与对照组相比，二甲双胍处理组的 HepG2 细胞增殖均明显受到抑制(P ＜0.05) ；G1 期细胞比例与对照组比较均明 显增加(P ＜0.05) ；RT-PCR 检测显示各二甲双胍处理组 REDD1 mRNA 的相对 表达量均明显高于对照组（P ＜0.01），cyclinD1 mRNA 的相对表达量均明显低 于对照组(P ＜0.05) ；western-blot 检测显示二甲双胍处理组 REDD1 蛋白相对表 达量与对照组比较明显升高(P ＜0.01) ，cyclinD1 蛋白相对表达量与对照组比较 明显下降(P ＜0.01) 。 结论：二甲双胍可抑制 HepG2 细胞的增殖活性，诱导 HepG2 细胞生长周 期阻滞于G1 期，并上调HepG2 细胞 REDD1 基因 mRNA 和蛋白的表达，抑制 cyclinD1 基因mRNA 和蛋白的表达，呈浓度依赖性。 关键词：二甲双胍；肝细胞癌；发育及 DNA 损伤反应调节基因 1 （REDD1 ）；细胞周期蛋白（cyclinD1 ） II 万方数据 Abstract ABSTRACT Objective ：To investigate the effects of metformin on proliferation of human hepatoma cell line HepG2 and the expression of REDD1 and cyclinD1. Methods ：HepG2 cells were cultured in vitro and treated with differect concentrations of metformin (0.0 ，2.5 ，5.0 ，10.0mmol/L). Changes in cell proliferation and cell cycle distribution were evaluated by MTT assay and flow cytometry, respectively.The expression levels of mRNA of REDD1 and cyclinD1 were detected by Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction （RT-PCR ） and the express