交通性污染对雄性小鼠生殖毒性以及分子机制的初步研究.pdfVIP

目 录 中文摘要3 英文摘要5 缩略词表7 1 前言 8 2 材料和方法 9 3 结果17 4 讨论26 5 结论30 参考文献31 致 谢34 综 述35 2 万方数据 交通性污染对雄性小鼠生殖毒性以及分子机制的初 步研究 中文摘要 目 的：本研究通过建立现场暴露交通污染环境和腹腔注射机动车尾气颗粒 物两种染毒试验，观察和分析交通性污染对雄性小鼠生殖毒性作用及可能的分子 机制，为人群生育健康的促进和制定有效保护措施提供科学依据。 方 法：本研究通过建立现场暴露交通污染环境染毒试验 （将 30 只清洁级雄 性昆明系小鼠随机分为重度污染暴露组、轻度污染暴露组和清洁环境空白对照组 3 个组，每组 10 只，进行现场暴露染毒，每 日持续暴露 10h，持续暴露 35d。） 的基础上，结合腹腔注射机动车尾气颗粒物染毒试验（将 40 只清洁级 ICR 雄性 小鼠随机分为对照组（PBS 溶液）、低剂量染毒组 (0.4mg/ml)、中剂量染毒组 (2mg/ml)和高剂量染毒组 (10mg/ml)4 个组，每组 10 只，每只小鼠均按 10ml/kg 的注射量进行，隔 24h 注射一次，持续 35d）。染毒后观察和分析交通性污染对 各组实验小鼠生殖器官发育、精子数量和质量、睾丸和附睾组织病理学变化等可 能存在的生殖毒性并通过分析实验小鼠睾丸细胞 DNA 损伤情况和血清睾酮含量 以及与其分泌密切相关基因P450scc 和 StAR 的mRNA 的相对表达量探讨可能的 分子机制。 结 果：现场暴露交通污染环境染毒试验和腹腔注射机动车尾气颗粒物染毒 试验均发现交通性污染物能影响实验小鼠生殖器官的发育，现场暴露交通污染环 境染毒试验的脏器系数分析显示与对照组小鼠相比，重度暴露组小鼠体重、睾丸 和附睾重、睾丸脏器系数下降；腹腔注射机动车尾气颗粒物染毒试验显示高剂量 组的附睾质量、附睾脏器系数下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。组织病理学结 果显示：现场暴露交通污染环境染毒试验中轻度和重度暴露组以及腹腔注射机动 车尾气颗粒物染毒试验中中剂量和高剂量小鼠睾丸和附睾组织有不同程度损伤。 与对照组相比，轻度和重度暴露组以及中剂量和高剂量小鼠精子数量下降，精子 畸形率上升，经检验以上差异均具有统计学意义 （P0.05）；在分子机制研究中 彗星试验显示：重度暴露组小鼠睾丸细胞 DNA 损伤率增加，与空白对照组相比， 3 万方数据 差异具有统计学意义 （P0.05）；腹腔注射机动车尾气颗粒物染毒试验显示高剂 量组血清睾酮含量以及睾丸组织基因 P450scc mRNA 相对表达量，与对照组相比 下降,差异具有统计学意义(P＜0.05) 。 结 论：交通污染以及交通污染重要组成成分机动车尾气颗粒物可能通过直 接损睾丸细胞 DNA 和（或）影响睾丸的分泌以及与其分泌密切相关的基因P450scc mRNA 的相对表达量的作用机制对雄性小鼠生殖系统的发育和功能造成一定程度 的损伤。 关键词：交通污染，机动车尾气颗粒物，病理组织学，单细胞凝胶电泳，细 胞色素 P450 侧链裂解酶，实时荧光定量 RT-PCR 4 万方数据