小檗胺对Jurkat细胞β-catenin信号通路的研究.pdfVIP

摘要 摘 要 目的： 研究生物碱小檗胺对人急性淋巴细胞白血病细胞 Jurkat 细胞增殖抑制、凋亡 及 β-catenin 的影响。 方法： 采用 MTT 法测定不同浓度小檗胺作用 Jurkat 细胞增殖抑制率，并计算 IC50 值。采用流式细胞术检测经小檗胺作用后 Jurkat 细胞的凋亡率。免疫印迹法分析 小檗胺作用细胞前后 β-catenin 表达量的变化，及免疫荧光检测药物作用前后 β-catenin 在细胞定位的变化。 结果： 1. 小檗胺抑制Jurkat 细胞增殖在一定范围内呈浓度— 时间依赖性，24h 、48h 、 72h 的IC50 值分别为 20.75μg/ml 、10.32μg/ml、6.75μg/ml 。 2. 流式细胞术检测 Jurkat 细胞经小檗胺作用 3h、12h、24h 的凋亡率分别为 7.1%、23.4% 、66.8%，凋亡细胞百分比的增加与小檗胺的作用时间明显正相关。 3.免疫印迹提示小檗胺作用 Jurkat 细胞后 β-catenin 表达下调。 4.免疫荧光提示经小檗胺作用后 β-catenin 向Jurkat 细胞核内转移减弱。 结论： 1）小檗胺能够抑制Jurkat 细胞的增殖并诱导其凋亡，在一定药物浓度范围 内其增殖抑制作用及诱导凋亡作用呈浓度-时间依赖性。 2 ）小檗胺诱导Jurkat 细胞凋亡可能是通过下调 β-catenin 蛋白的表达来实现。 3 ）小檗胺可能通过抑制Jurkat 细胞内 β-catenin 的核转位来诱导其凋亡。 关键词：小檗胺；白血病；Jurkat 细胞；β-catenin；核转位 II 万方数据 Abstract ABSTRACT Objective ： To investigate the expression of β-catenin in Jurkat cells on the effect of berbamin. Methods ： The MTT assay was used to detect inhibition rate of Jurkat cells and calculate the IC50.Flow cytometry was used to detect cell apoptosis rate. The chang of expression of β-catenin in Jurkat cells was analyzed through western blot. How the position of β-catenin change in Jurkat Cells was studied after the effect of berbamine. Result ： 1.MTT tests revealed that bebamine inhibited Jurkat cells in dose-and time-dependent manner.The IC50 values of berbamine were 20.75μg/ml、10.32μg/ml 、 6.75μg/ml for 24h、48h and 72h.