钌(Ⅱ)配合物与DNA相互作用的光谱研究论文.docVIP

　　钌(Ⅱ)配合物与DNA相互作用的光谱研究论文 【摘要】 目的 设计合成一个钌(Ⅱ)多吡啶配合物［Ru(dmp)2(dpip)］2+（dmp=1,10邻菲咯啉，dpip=2(6,9二氧环己环苯基)咪唑并［4,5f］邻菲咯啉）,研究该配合物与DNA的相互作用。方法 采用元素分析、质谱和1H NMR对其进行表征，用电子吸收光谱、黏度测试、DNA熔点变化和圆二色谱研究配合物与DNA的作用。结果与结论 所合成的配合物结构得到确证，该配合物与DNA之间通过插入作用结合。 【关键词】 钌(Ⅱ)多吡啶配合物 DNA 电子吸收光谱 元素分析 圆二色谱 Abstract:Ruthenium (Ⅱ) polypyridyl plex ［Ru(dmp)2(dpip)］2+ (dpip=2(6,9dioxanophenyl)imidazo［4,5f］［1,10］phenanthroline, dmp=2,9dimethyl1,10phenanthroline) has been synthesized and characterized by element analysis, ESMS and 1H NMR. The interactions of the plex al denaturation,.freeleasurement and circular dichroism. The results shop)2(dpip)］2+ intercalates into the DNA base pair via the intercalative ligand. Key (Ⅱ) polypyridyl plex; thermal denaturation; DNAbinding 在过去10年，钌（Ⅱ）多吡啶配合物和DNA作用的研究成为生物无机化学一个非常活跃的领域，理解小分子化合物与DNA作用机理，有助于人们设计新的抗肿瘤药物和高灵敏度的光谱探针及诊断试剂［1］。随着对金属配合物与DNA作用的深入研究，现在人们普遍认识到小分子化合物与DNA的非共价结合有静电作用、面式结合和插入结合3种作用机理。由于钌(Ⅱ)多吡啶配合物具有丰富的光化学、光物理、电化学性质.freelp)2(dpip)］(ClO4)2 (dmp=2,9二甲基1,10邻菲咯啉，dpip=2(6,9二氧环己环苯基)咪唑并［4,5f］邻菲咯啉)，合成路线见图1，对其结构进行了表征，并对配合物与DNA相互作用的机理进行了研究。 图1 配体及配合物合成路线 1 实验部分 1.1 试剂和仪器 所用化学试剂均为分析纯，使用前未经进一步纯化。小牛胸腺DNA购自华美公司，配合物用5 mmol/L TrisHCl，50 mmol/LNaCl(pH=7.2) 缓冲溶液配制。 LCQ电喷雾质谱仪(ESMS, Finnigan)，PerkinElmer 240 元素分析仪，Bruker DRX500型核磁共振仪，Shimadzu UV2501 PC型紫外可见光谱仪，Ubbelodle黏度测定仪，JASCO J725型圆二色谱仪。 1.2 实验方法 紫外可见吸收光谱实验中，在参比池和样品池中分别加入等量的DNA以消除DNA本身的吸收，当配合物的电子吸收光谱不再变化，此时吸收滴定达到饱和。 黏度测试是在（28±0.1） ℃温度下，DNA溶液浓度固定，配合物的浓度不断增加，测定DNA溶液的黏度随着配合物浓度的变化。 配合物［Ru(dmp)2(dpip)］(ClO4)2与DNA结合常数根据下列方程求得［2-4］ (εa–εf)/(εb-εf)= (b-(b2–2K2Ct［DNA］/s)1/2)/(2KCt) (1) b=1+KCt+K［DNA］/2s (2) εa， εf ，εb分别是配合物与DNA结合，自由配合物和配合物与DNA结合达到饱和时的摩尔吸光系数，K为结合常数，Ct为配合物的浓度，s为配合物与DNA的结合位置大?２饬筐ざ仁保露裙潭ㄔ?28±0.1) ℃。测试液配制方法：固定DNA的浓度，逐渐增加配合物的浓度。相对黏度按下式计算［5］： η=(t–t0)/t0 式中，t0为缓冲溶液流经毛细管所需时间，t为DNA溶液（含不同浓度的配合物）流经毛细管所需时间。以 (η/η0)1/3对结合比率r(r=［Ru］/［DNA］)作图， η0为未加配合物的溶液的相对黏度。 DNA熔点测定实验中，TrisHCl溶液作为参比溶液，而DNARu(Ⅱ)溶液熔点测定，则以配合物作为参比溶液。 1.3 配合物的合成与表征 配合物［Ru(dmp)2(dpip)］2+按文献［6］的方法合成，产率66%。