非诺贝特对高糖培养肾小球系膜细胞胞外基质产生及降解影响论文.docVIP

　　非诺贝特对高糖培养肾小球系膜细胞胞外基质产生及降解影响论文 倪连松，金洁娜，郑景晨，沈飞霞 【摘要】 目的 ：探讨非诺贝特对糖尿病肾病的保护机制。方法：大鼠肾小球系膜细胞分别培养在正常糖浓度（5.5 mmol·L-1，对照组）、高糖浓度（25 mmol·L-1，高糖组）及25 mmol·L-1葡萄糖+非诺贝特100μmol·L-1（非诺贝特组）。CCK-8测定系膜细胞增殖；ELISA法检测培养上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)；明胶酶谱法检测培养上清基质金属蛋白酶-2，9(MMP-2，9)的活性。结果 ：高糖组系膜细胞较对照组出现增殖增加.freelechanism of fenofibrate on diabetic nephropathy. Methods: Rat mesangial cells (MC) edia containing 5.5 mmol·L-1 glucose （control group），25 mmol·L-1 high glucose (HG group) and 25 mmol·L-1 glucose+100μmol·L-1 fenofibrate (FB group). Cellular proliferation ing groatrix metalloproteinase inhibitor-1(TIMP-1) in supernatant ethod. Activities of matrix metalloproteinase-2，9 (MMP-2，9) in supernatant ography. Results: pared ent. Conclusion: Fenofibrate can inhibit high glucose-induced proliferation of mesangial cells， decrease synthesis of extracellular matrix， and increase degradation of extracellular matrix. Key esangial cells 过氧化物酶体增殖体激活受体(PPARs)是一种配体依赖性转录因子，属于核受体基因家族。PPARs包括PPARα，PPARβ和PPARγ三种亚型。最近人们发现 PPARα在肾脏疾病治疗中是一个新的靶点1。PPARα可通过对单核巨噬细胞的影响而发挥其强大的抗炎作用， 因此PPARα活性改变可能参与肾脏炎症反应过程1。贝特类药物可通过激活PPARα，调整其在肾脏的表达，从而降低肾血管性肾炎、肾血管性硬化症及糖尿病肾病等肾病的发生1。目前，有关贝特类药物对糖尿病肾病保护作用的研究还很少见。为进一步证实贝特类药物对糖尿病肾病的保护作用，我们拟观察非诺贝特（FB）对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及其分泌细胞外基质成分（IV型胶原、纤连蛋白）的影响，并同时检测其对转化生长因子-β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶-2，9、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响，以探讨其作用机制，并为其进一步的临床应用提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 材料 大鼠肾小球系膜细胞（MC）为武汉大学中国典型培养物保藏中心的大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)，CCTCC编号：GDC124。非诺贝特（Fenofibrate，FB）购自徐州恩华药业集团有限责任公司（产品批号。CCK-8试剂盒购购自日本同仁化学研究所，DMEM培养液为Gibco公司产品，胎牛血清为天津正江公司产品。分光光度仪为Backman DU460。酶标仪为美国Bio-tek Instruments ELX 800。IV型胶原（Col-IV）ELISA检测试剂盒、TIMP-1 ELISA检测试剂盒、TGF-β1 ELISA检测试剂盒购自美国Bione-aciutical Biotechnology公司，纤连蛋白（FN）ELISA检测试剂盒购自大连泛邦化工技术开发有限公司（日本进口分装）。 1.2 方法 1.2.1 MC培养：大鼠MC常规培养在含10%胎牛血清、葡萄糖浓度5.5 mmol·L-1的DMEM培养液中，置37 ℃、5% CO2孵箱中培养。2～3 d传代1次。 1.2.2 实验分组：①正常对照组(control group)：葡萄糖5.5 mmol·L-1；②高糖组(HG group)：葡萄糖25 mmol·L-1；③非诺贝特组(FB group)：非诺贝特100μmol·L-1+葡萄糖25 mmol·L-1。 1.2.3 系膜细胞增殖实验(CCK-8细