非霍奇金淋巴瘤患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞研究论文.docVIP

　　非霍奇金淋巴瘤患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞研究论文 .freelphoma Abstract This study ed to analyze the proportion of T cell subsets，CD4+ CD25high regulatong T cells (Tr) in peripheral blood of B-NHL patients and thier change regularity，and to investigate the immunosuppression mechanism and influence of chemotherapy on immunosuppression function of B-NHL patients. The peripheral blood 42 patients ission (PR)or plete remission (CR) after 4-6 cycles of chemotherapy and 15 healthy controls. By using monoclonal antibodies，the blood samples etry for lymphocyte subsets and Tr cells. The results shootherapy group otherapy group o-/radio-therapy and the control. It is concluded that the relative increase of CD4+ CD25high Tr cells in peripheral blood of B-NHL parients may be related to immunosuppression and tumor progression. Key phoma；T-cell subset；chemotherapy/radiotherapy；CD4+ CD25high regulatory T cells 近期动物实验发现一个有独特免疫调节功能的Ｔ细胞亚群: CD4+ CD25+调节性T(Tr)细胞，它不仅能抑制自身免疫性疾病发生，还可能参与肿瘤免疫的调节；该细胞通过与细胞直接接触发挥作用，而不依赖于其分泌的细胞因子。肿瘤环境中 CD4+ CD25+调节性T细胞比例增加，导致肿瘤免疫失调［1］。而正常人外周血中主要是表达高水平的CD25的CD4 T细胞（CD4+ CD25high），后者具有与小鼠体内 CD4+ CD25+ 调节性 Ｔ 细胞免疫调节的作用［2］。 本研究采用流式细胞术分析初治化疗前及多程化疗后B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）患者外周血CD4+ CD25high Tr细胞比例及其变化的特点，初步探讨其与肿瘤发生、发展的关系及其临床意义。 材料和方法 临床病例 本组78例B-NHL均为2002年10月- 2005年2月在华中科技大学协和医院肿瘤中心及协和医院血液病研究所门诊/住院患者，均经病理学确诊。其中初治化疗前患者42例，经4－6周期CHOP方案化疗达CR/PR患者36例。所有患者3月内未接受输血和其他治疗，PS状态≤1。对照组为我院体检健康者15例，男9例，女6例，年龄26-68岁，平均48.2±12岁（表１）。Table 1. Clinical characteristics of ７８ B-NHL patients and １５ healthy controls（略） 主要试剂 PE标记的鼠抗人CD4、CD8抗体，FITC标记的鼠抗人CD25、CD3抗体，同型对照分别为PE标记的鼠抗人IgG1免疫球蛋白，FITC标记的鼠抗人IgG1免疫球蛋白，均为美国Becton Dickinson公司产品。 方法 所有观察对象均于清晨空腹抽取静脉血2 ml，EDTA抗凝。应用荧光直接标记法及流式细胞仪检测外周血单个核细胞（PBMNC）膜表面CD3 、CD4、CD8、CD25。取不同荧光标记的单克隆抗体各20 μl，分别加入100 μl肝素抗凝的外周血中，室温下孵育15分钟，加入红细胞裂解液，用PBS洗涤2次，用流式细胞仪（Becton Dickinson公司，FACS Calibur）检测，Cellquest软件分析数据，记录阳性细胞百分率，减去非特异对照值。 统计学处理 SAS软件进行单因素方差分析比较化疗前组、化疗后组、正常对照组外周血T细胞亚群的差别。以P 0.05定义为有统计学意义。 结 果 B-NHL化疗前组外周血调节T细胞比例 化疗前组患者CD3+ 、 CD4+ T细胞及CD4/CD8比值低于正常对照组，但其CD4+