中药化学-7-2.ppt

1 第4节 黄酮类化合物的色谱检识 一、纸色谱（PC） 双向纸色谱层析：分离黄酮及黄酮苷 第一向：醇性展开剂，如n-BuOH-HOAc-H2O（4：1：5，上层，BAW ）、 t-BuOH-HOAc-H2O（3：1：1，TBA ） 、水饱和正丁醇等 正相，极性小的化合物Rf值大。适合游离黄酮。 第二向：水性展开剂，如水、2～5％乙酸等。 　 反相，极性大的化合物Rf值大。适合黄酮苷。 显色： UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。 二、薄层色谱法（TLC） （1）硅胶：适用于极性小的弱酸性黄酮类化合物。 展开剂：多用有机溶剂，如氯仿/甲醇。 （2）聚酰胺：游离黄酮苷元及其苷。 展开剂：极性强，大多含醇、酸或水。 （3）纤维素：分离黄酮苷元及苷。 展开剂：醇性或水性。 显色： UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。 第5节　黄酮类化合物的结构测定 一、紫外光谱（UV） 原理：是分子中某些价电子吸收了一定波长的电磁波,由低能级跃近到高能级而产生的一种光谱。 引起分子中电子能级跃迁光波波长范围：100-800 nm. λmax：跃迁电子的能级差 εmax：电子跃迁的机率 一、紫外光谱（UV） 类型： σ-σ* 150nm 　 n -σ* 150 ～ 250nm (N,O) 　 π-π* 160 ～ 200nm (非共轭) 　 n -π* 280 ～ 300nm 常见化合物 共轭烯烃：π-π*，210 ～ 270nm，K带，ε≥104 α,β-不饱和醛酮：n-π*，290 ～ 310nm，R带，ε=10-100 一、紫外光谱（UV） 常用术语 生色团：分子中产生所示谱带的主要功能团。 助色团：与生色团相连使生色团波长红移且强度增大。 红（紫）移：基团或溶剂的影响，波长增大（减小）。 增色效应：溶剂或助色团影响，吸收强度增大的效应。 减色效应：取代或溶剂的影响，吸收强度减小的效应。 溶剂效应：不同溶剂中谱带产生的位移。 末端吸收：在仪器极限处测出的吸收。 肩峰：吸收曲线在下降或上升处有停顿或增加或降低。 黄酮类化合物的UV光谱 诊断试剂： 能使黄酮的酚-OH离解或形成络合物，导致UV光谱变化，对判断结构有诊断意义的试剂。如NaOMe、NaOAc、NaOAc-H3BO3、AlCl3、AlCl3/HCl等。 （一）黄酮、黄酮醇类 （1）黄酮与黄酮醇UV图形相似，仅带Ⅰ位置不同，可用于区别。 黄酮：304-350 nm 黄酮醇：352-385nm（游离），328-357nm（成苷） （一）黄酮、黄酮醇类 （2） A、B环上的取代基影响相应的吸收峰峰位和峰形 如含氧取代基，会使相应吸收带红移。 A环：7-OH、-OCH3，Ⅱ红移 5-OH，Ⅰ、Ⅱ均红移 B环：4’-OH或-OCH3、3-OH，Ⅰ红移 若有邻二酚-OH，会使带Ⅱ歧分，出现肩峰。 （3）母核上-OH苷化，会引起相应吸收带紫移，特别是带Ⅰ。 （一）黄酮、黄酮醇类 利用诊断试剂对黄酮（醇）UV光谱的影响检出羟基位置 1. 甲醇钠（NaOMe） 2. 乙酸钠（ NaOAc ） 3.乙酸钠/硼酸（ NaOAc/H3BO3 ） 4. 三氯化铝及三氯化铝/盐酸（ AlCl3 与AlCl3/HCl ） （一）黄酮、黄酮醇类 1.甲醇钠（NaOMe） 碱性强，使所有酚-OH解离，促进电子跃迁，使相应带红移 （1）Ⅰ红移40-65nm，强度不变或增强，有4’-OH。 （2）Ⅰ红移50-60nm，强度减弱，有3-OH（无4’-OH） （3）7-OH，Ⅱ红移;且在320-330nm有新吸收带,成苷后消失 （4）含3,4’-、3,3’,4’-、5,3’,4’-、5,6,7-、5,7,8-OH的黄酮类，在NaOMe作用下易氧化破坏，吸收带随测定时间延长而衰退。 （一）黄酮、黄酮醇类 2. 乙酸钠（ NaOAc ） 碱性比甲醇钠小，仅使7-、4’-OH解离，相应吸收带红移。 （1）7-OH，带Ⅱ红移5-20nm； 若6-、8-同时有含氧基，Ⅱ红移很小（几乎不位移）。 （2）4’-OH，带Ⅰ红移40-65nm（与MeONa相同）。 （3）存在碱敏感结构时，如含3,4’-、3,3’,