华东理工大学-过程分子生物学2.ppt

基因的表达与调控 细胞通讯的基本概念 2 I 细胞分裂素信号转导途径 在拟南芥菜（Arabidopsis）的细胞分裂素信号转导途径中，杂合型的组氨酸蛋白激酶AHK作为细胞分裂素的受体，组氨酸磷酸转移蛋白APH则负责将信号从AHK传递到核内应答调控因子ARR上，进而激活或者阻遏相关基因的转录。玉米中也发现了相似的组份，因此细胞 分裂素介导的信号转导途径在植物中具有相当的保守性。 a 细胞分裂素信号转导途径的工作原理 细胞分裂素信号转导途径有四个主要的步骤：（1）AHK感应信号分子；（2）APH转位核内；（3）ARR激活转录；（4）细胞分裂素诱 导ARR基因表达产物的反馈抑制。 修饰灭活 细胞内某些丝氨酸磷酸化反应以及蛋白质的翻译后修饰作用会削弱STAT的活性。更为特异性的抑制信号来自蛋白酪氨酸磷酸酶，它们能在膜结合型的受体激酶复合物水平上或者在核内，除去被激活的STAT二聚体上的磷酸基团，剩下的STAT单体则重新回到细胞质中。此外，还有一种名叫激活型STAT蛋白抑制剂（PIAS）的因子能直接与磷酸化 的STAT二聚体结合，从而阻止其对DNA元件的识别。 2F TNF信号转导途径 肿瘤坏死因子（TNF）是细胞凋亡、炎症发生、免疫调节过程中一类重要的枢纽分子，它涉及到人类多种疾病的发病机制，如败血症、糖尿病、癌症、骨质疏松症、多重硬化症、肠炎、风湿性关节炎等。TNF与TNF受体-1（TNF-R1）相互作用，能激活若干 信号转导途径。 2F TNF信号转导途径 早在一百年前就有人指出了TNF的抗癌活性，然而直到1984年纯化了人的TNF并克隆表达了其cDNA编码区，人们才对TNF的多重生物活性有了一个全景式 的了解。 a TNF的结构与功能 TNF是一种由激活的巨噬细胞合成的同源三聚体，每个亚基有157个氨基酸。它能作用于两种不同的细胞表面受体TNF-R1和TNF-R2，其中TNF-R1介导TNF的大部分生理活性。TNF与TNF-R1的结合能触发一系列细胞内的级联反应，最终激活两大核内转录因子kB（NF-kB）和c-Jun。这两大转录因子可诱导表达一组具有重要生理功能的基因，涉及细胞的生长凋亡、组织发育、肿瘤发生、免疫识别、 炎症反应、环境压力应答等过程。 TNF与其受体TNF-R1所介导的信号转导途径的一个共同特征是，TNF能在细 膜上诱导形成多蛋白信号转导复合物。 2F TNF信号转导途径 b TNF信号转导途径的工作原理 TNF信号转导途径的第一步是TNF三聚体与TNF-R1的胞外功能域特异性结合，并从TNF-R1的胞内功能域上释放出致死功能域（SODD）的抑制蛋白因子；由此集聚起来的TNF-R1胞内功能域又为TNF受体结合型致死功能域（TRADD）所识别；TRADD再吸引另外三种脚手架因子：受体相互作用型蛋白RIP、TNF-R结合因子2（TRAF2）、Fas结合型致死功能域FADD；然后，上述三种脚手架蛋白再将一些关键的酶分子分别召集起 来，进而启动三条分支途径的信号转导。 由FADD介导的分支途径 Fas结合型致死功能域FADD将caspase-8蛋白酶召集到TNF-R1复合物上，同时激活caspase-8（通过该蛋白酶的自降解效应），并由此引发一系列蛋白降解反 （Fas途径） 应，最终导致细胞凋亡。 由TRAF2介导的分支途径 TRAF2召集细胞凋亡蛋白-1的两个抑制剂cIAP-1和cIAP-2，对细胞实施抗凋亡作用；此外，TRAF2还能激活有丝分裂原激活的蛋白激酶的激酶的激酶（MAPKKK），如胞外信号调节型的激酶的激酶的激酶1（MEKK1）或凋亡刺激型激酶1（ASK1），它们通常以复合物的形式存在于受体的周围，进而激活一个激酶级联反应，最终导致c-Jun N端激酶（JNK）的激活，后者再使c-Jun磷酸化，并增强其转录刺激功能 由RIP介导的分支途径 RIP是一种蛋白激酶，起着最终激活转录因子NF-kB的功能，但RIP不是TNF诱导的NF-kB激活所必需的。NF-kB的激活过程依赖于磷酸化控制的泛激素化反应以及kB抑制剂（IkB）的降解作用，后者在未受刺激的细胞胞质中与NF-kB结合在一起。IkB激酶（IKK）是一种多蛋白复合物，以TNF诱导的方式使IkB磷酸化。IKK复合物的核心由两个催化亚基IKKa、 IKKb和一个调节亚基NEMO（NF-kB必 需的调节因子，又称IKKg）构成。此外，IKK复合物中还含有一个激酶特异性的分子伴侣，由Cdc37和Hsp90两种蛋白组成，其功能是帮助IKK复合物在胞质与质膜之间穿梭移动。RIP将上述IKK复合物吸引到的自己身边，并激活之，该过程通常在TNF配 信号处理受体后数分钟内便