巫-第十三章蛋白质的生物合成.ppt

5’-末端有一个甲基化的鸟苷酸，称为“帽结构” 3’-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA)，称为 “尾结构” 。 在64个密码子中有61个编码氨基酸，3个不编码任何氨基酸而起肽链合成的终止作用，称为终止密码子，它们是UAA、UAG、UGA，密码子AUG（编码Met）又称起始密码子。 1. 密码的无标点性、无重叠性 2. 密码子的简并性 3. 密码子的摆动性 4. 密码子的通用性 原料：20种L-氨基酸； 3种RNA：mRNA, tRNA, rRNA 酶：氨基酰tRNA合成酶、转肽酶 两种高能核苷酸： ATP、 GTP 金属离子：K+ 、Mg2+（促进肽键形成) 多种蛋白质因子: 起始因子: IF或eIF 延长因子：EF或eEF 释放因子：RF或eRF 氨基酸活化 起始阶段 进位 过程 延长阶段 成肽 终止阶段 转位 1. 氨基酸的活化 AA+ATP+酶→[AA ? AMP?酶] +ppi 2. 氨酰tRNA 的形成 [AA ? AMP?酶]+tRNA → AMP + AA-tRNA+酶 1种AA可由几种tRNA（同工受体tRNA）运载 氨酰tRNA合成酶对氨基酸、tRNA两种底物都有高度特异地识别作用，还有水解酯键的催化作用，发挥酶的校正活性。 ① 甲硫氨酸+ tRNAf +ATP → Met-tRNAf +AMP+PPi 见动画 1 翻译过程中的肽链延长又称核糖体循环（ribosomal cycle）。 分三步骤： 进位(结合） 核糖体循环 转肽（转肽酶） 移位 肽链的延伸 2 转肽（形成肽键） 肽酰转移酶：转肽酶， P位点 A位点 形成肽键：P位点的fMet- tRNAf（或肽酰- tRNA）的羧基与A位点的AA- tRNA的氨基结合 形成肽键不消耗GTP，可能来自AA~ tRNA（或肽酰~tRNA）间的酯键水解 3 移位 肽酰基-tRNA从核糖体的A位移到P位的过程 核糖体沿mRNA的5’----3’方向移动与移位过程相偶联（每次移动距离是1个密码子） 移位酶 ，EF-G（G因子） 消耗1个GTP 见动画 2 肽链的延伸 ? 进位 ? 转肽 ? 移位 见动画 3 释放因子(RF)：终止肽链合成并将其从核糖体上释放出来的一类蛋白质因子。 终止密码子：UAA、UAG、UGA RF1: UAA、UAG RF2: UAA、UGA RF3: 不识别终止密码子，与GTP结合，并促进RF1和RF2与A位点结合。 （1）终止密码子（UAA、UAG、UGA）出现在核糖体A位时，释放因子（RF）就与之结合， （2）肽基转移酶变为水解酶，使新生的肽链与tRNA 分离，并从核糖体上脱落下来， （3） mRNA 释出，大小亚基分离（GTP) 思考题：合成100个氨基酸的多肽需要消耗多少个高能磷酸键？(400) 合成100个氨基酸需要消耗多少个高能磷酸键？ 1)100个氨基酸活化成AA-tRNA消耗数：100 X 2=200 （ATP----AMP） 2）起始的fMet-tRNA进入P位点及起始复合物形成消耗GTP数：1 GTP 3）99个AA-tRNA进入A位点消耗GTP数： 99X1=99GTP 4）肽键形成不消耗GTP 5）99个氨基酸移位消耗消耗GTP数： 99X1=99GTP 6）肽链释放消耗GTP数：1 GTP 总数：200+1+99+99+1=400 1. 进位 ? 氨酰-tRNA 与核糖体A位结合。消耗1分子GTP。 2. 转肽 ? 核糖体A位和P位上的氨基酸间形成肽键。 3. 移位 ? 核糖体延mRNA的5’ → 3’方向移动一个密码子。 移位酶 肽链的延伸 进入 转肽 移位 P A 5’ 3’ Met AGU P A 5’ 3’ Met AUG f f AUG 3’ P A 5’ Met AUG 2 3’ P A 5’ Met AUG 2 进位 f f 3’ P A 5’ met AUG 2 3 P A 3’ 5’ AUG met 2