壳寡糖降血脂作用及与RAP的表达相关性研究.pdfVIP

中国临床医学 2fJf)7年12月 第 14卷 第6期 Clinical Medical Journal of China，2{I(17 ． Vo1．14．No．6 749 论著 壳寡糖降血脂作用及与RAP的表达相关性研究 胡迎青 陆雪华! 汪晓莺 刘晓娟 摘要 目的：研究壳寡糖降脂作用和受体相关蛋白RAP表达与壳寡糖在降血脂作用中的关系。方法：采用P,T PCR方法克 隆RAP基因片段-插入表达载体PGEX获得了重组基因PGEX—RAP，转化入大肠杆菌DH5a．通过IP1、G诱导表达了GST— RAI’重组融合蛋白。运用单抗制备技术制备抗RAP单克隆抗体McAb—rap。用新西兰家兔制备高脂血症动物模型。分组分 别观察和比较服用壳寡糖和辛伐他汀的降脂作用．TC、LDI 一C含量的动态变化；观察实验各组RAP的表达量变化并进行分 析。结果：体外成功诱导表达并纯化了( sT RAP融合蛋白，获得了单克隆抗体McAb—rap，其能识别天然膜抗原RAP。壳寡 糖、辛伐他汀均能降低血清中TC、LDI 一C浓度；壳寡糖降脂效果不如辛伐他汀显著(PO．01)；实验各组均表达RAP，但表达 量各有差异。在高脂血症动物模型血管壁、心肌中RAP的表达量明显高于正常对照组。口服壳寡糖后高脂模型家兔血管 壁、心肌中RAP表达量高于口服辛伐他汀组。在实验模型各组血管壁出现一条分子量约8f)kD左右蛋白特异带．在正常家兔 血管壁中未见。结论：壳寡糖具有一定的降血脂作用；血脂紊乱可引起血管壁、心肌 RAP的表达增加；RAP的表达量与血脂 水平的调控、壳寡糖在高脂血症中的降脂作用机制密切相关。80 kD左右特异表达带的蛋白性质及在血脂调节中的作用有待 进一步研究。 关键词 壳寡糖； 受体相关蛋白； 心肌； 血管壁 中图分类号 R972 ．6 文献标识码 A Research on Chitosan Olig0saccharide Effect on Blood Lipid Level in Hypercholesterotemic and Its Correla— tionship with of Expression of Recept0r_ass0ciated Protion H L，Yingqing L L，Xuhixa WANG Xiaoy— ing L儿，Xiaoj gg61n 1．Department of Immunology，Nanto 7tg’Universily，‘，iangsu Nantong 226001； 2．Department of Cardiovascular Internal Medicine，Nantong’University A厂_『 iliated Hospital，‘，iangsu ． Na ntong 2260t)1 Abstract Objective： Fo st udy the effects of Chitosan oligosaccharide on reducing the blood lipid in hypercholesterotemic in rabbits and Expression of Recepwr associated Protion(RAP)is related with regulated blood lipid．Methods One，fragment of gene(RAP)was gotten by RT PCR and the recombinant plasmid(PGEX RAP)was constructed by inserting the RAP cDNA into the PGEX．The the recombinant plasmid was transfe