醋酸地塞米松的定量分析.docVIP

醋酸地塞米松片的定量分析 实验目的 1．掌握药物结构与分析方法之间的关系。 2．掌握常用分析方法的基本操作与药物含量计算。 3．熟悉专业文献资料的查阅； 4．了解药品分析工作的全过程和如何根据文献资料进行实验设计。 5、本实验使用高效液相色谱法，要求掌握高效液相色谱法测定醋酸地塞米松含量的操作条件及要点。 二、实验原理 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，根据各种各样的化工互作用力来分离混合物。这种互作用力通常是分析物及分析管柱之间的一种非共价性质。使用高效液相色谱时，液体待检测物在不同的时间被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，每个峰顶都代表一个另外化合物的种类，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。以液体为流动相而设计的色谱分析仪器称为液相色谱仪。采用高压输液泵，高效固定相和高压灵敏检测器等装置的液相色谱仪成为高效液相色谱仪。高效液相色谱仪种类繁多，但不论何种类型的高效液相色谱仪，基本上都分为4个部分：高压输液装置，进样系统，分离系统和检测系统。 高效液相色谱作为一种重要的分析方法，广泛的应用于化学和生化分析中，常用于医药品、化学、环保、生命科学、与食品工业的研究上。 高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，可将液体混合物中的成分分离、成分定性及定量分析。适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。16α-甲基-11β，17α，21-三羟基-9α-氟孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮21-醋酸酯。 按干燥品计算，含C24H31FO6应为97.0%-102.0%。11.16-39.06μg*ml-1, r= 0.9999, 平均回收率为98.82% , RSD 为1.76% 。本方法简单, 专属性强, 重现好, 易于操作。 黄波等[3]对复方醋酸地塞米松乳膏中醋酸地塞米松的含量测定方法进行改进，采用HPLC外标法测定，色谱柱为Diamonsil C18柱(4.6mm×250mm，5μm) ，流动相为甲醇-水(70:30) ，检测波长为240nm。结果醋酸地塞米松的线性范围:5.2-38.7μg/L，平均加样回收率(n=6)为99.85%（RSD为1.7%）。 苗彩云等[4]采用紫外分光光度(UV)法测定醋酸地塞米松的含量，线性关系考察表明在1.0-40.0mg/L范围内吸收度（Y)与浓度（X)呈良好的线性关系，精密度试验在240nm波长处重复测定6次，吸收度RSD为0.26%，稳定度试验取对照品溶液于室温下放置0，2，6，12，24h，吸收度几乎无变化，RSD为0.65%，表明稳定性良好，重复性试验以无水乙醇为空白，在240nm波长处测定吸收度，醋酸地塞米松吸收度的RSD为0.59%，表明该法重复性良好。 近几年来,出现了以添加与醋酸地塞米松有类似UV光谱的化学物质和少量含氟物质的方法制售假劣醋酸地塞米松片。而现行的紫外检测方法是鉴别不出其真伪的。实验研究证明,采用HPLC法对醋酸地塞米松片进行鉴别和含量测定,专属性强,重现性好,可及时检出假劣醋酸地塞米松片,且方法简单,易于操作。 因此我们选择HPLC测量醋酸地塞米松片的含量。 三、实验试剂及仪器设备 1、仪器：高效液相色谱仪、精密电子天平、超声波清洗器 2、试剂药品：醋酸地塞米松对照品、醋酸地塞米松片、甲醇（色谱纯）、水为重蒸馏水、其他试剂均为分析纯。 四、实验操作[2] 1、色谱条件 色谱柱:Diamonsil(TM)C18(4.6mmX200mm,5μm)；流动相：甲醇-水(70：30)；检测波长：240nm；流速：1.0ml/min；进样量:20μl；柱温：室温；理论板数按醋酸地塞米松峰计算4078；测定方法：外标法。在此色谱条件下，醋酸地塞米松峰保留时间约为7.4分钟，主峰峰形对称，辅料对主峰检测无干扰。 2、溶液配制 取在105℃干燥至恒重的醋酸地塞米松对照品约13mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇35ml使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，密度约为0.26mg/ml-1。 3、标准曲线制备 精密量取上述储备液2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0ml,分别置于50ml容量瓶中，各精密加入甲醇稀释至刻度，摇匀。各取20μl进样，以醋酸地塞米松测得峰面积A为纵坐标，其溶液浓度C（μg）为横坐标，进行线性回归。 4、精密度实验 精密量取上述的任一