姜黄素对肺腺癌A549细胞中SCF泛素连接酶及其生物学行为的影响.pdfVIP

摘要 摘 要 目的： 应用姜黄素处理肺腺癌A549 细胞，观察细胞形态学变化，检测细胞增殖、 细胞周期、细胞凋亡及SCF 泛素连接酶活性的变化，以探讨姜黄素对肺腺癌A549 细胞生物学行为的影响及相关的分子作用机制，为姜黄素在肺癌的临床应用提 供理论基础和新方法。 方法： 1、建立传代肺腺癌A549 细胞干预模型，姜黄素以浓度梯度方式（0、10、 20 、40 、80umol/L）处理肺癌细胞24h 、48h 、72h，倒置显微镜下观察药物处理 后细胞形态特征的变化，MTT 法检测姜黄素对肺癌细胞增殖的影响，计算出不 同时间段的药物IC50 。 2 、根据药物IC50 值选取适当浓度的姜黄素处理肺癌细胞，流式细胞术检测 不同时间段(0h 、24h 、48h)姜黄素对肺癌细胞周期的影响。 3、用不同浓度（0、10、20 、40umol/L ）的姜黄素处理肺癌细胞不同时间（12h 、 24h 、48h ），流式细胞术检测姜黄素对肺癌细胞凋亡的影响。 4 、Western blotting 法检测不同浓度 （0、10、20 、40umol/L ）的姜黄素处理 不同时间(24h 、48h 、72h)后肺癌A549 细胞中SCF 泛素连接酶结构蛋白Cul1、 Skp2 及周期蛋白p27 的表达变化。 结果： 1、姜黄素能抑制肺癌A549 细胞的生长增殖，并呈时间和浓度依赖性，其 作用48h 、72h 的药物IC50 分别是27.98umol/L、20.98umol/L。 2 、姜黄素能诱导肺癌A549 细胞的周期阻滞于G1 期，并呈时间依赖性。 3、姜黄素能促进肺癌A549 细胞的凋亡，并呈时间和浓度依赖性。 4 、姜黄素能下调SCF 泛素连接酶结构蛋白Skp2 、Cul1 的表达，并上调周 期调控蛋白p27 的表达。 结论： 姜黄素可能通过抑制SCF泛素连接酶的活性来诱导肺癌A549细胞周期阻滞 II 万方数据 摘要 于G1期，抑制细胞的生长增殖，并促进肺癌细胞的凋亡，从而发挥其对肺癌细 胞的抗癌作用，可为肺癌的防治提供新途径。 关键词：肺腺癌；姜黄素；SCF 泛素连接酶；细胞周期；细胞凋亡 III 万方数据 Abstract ABSTRACT Objective: Human lung adenocarcinoma A549 cells were disposed by curcumin, observed the change of the cell morphology, detected the cell cycle, cell proliferation, apoptosis and activity of ubiquitin - protease in A549 cells, to investigate the effect of curcumin on biological behavior of A549 cells and related molecular mechanism, which would provide theoretical basis and new approach for the c