细胞壁组分在红酵母RS1高耐铝中的作用研究.pdfVIP

土 壤 (Soils), 2017, 49(2): 256–260 DOI: 10.13758/ki.tr.2017.02.007 细胞壁组分在红酵母 RS1 高耐铝中的作用研究① 1,2 1 1 1* 胡振民 ，赵学强 ，王 超 ，沈仁芳 (1 土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所)，南京 210008 ；2 中国科学院大学，北京 100049) 摘 要：红酵母 RS1 是从酸性油茶土壤中分离到的一株高耐铝微生物，能够忍耐高达 200 mmol/L 以上的铝，前 期研究表明 RS1 高耐铝能力与细胞壁有关，但是其具体机制还不清楚。因此，本文进一步研究了细胞壁组分在 RS1 高耐铝中的作用，以期为 RS1 高耐铝的具体机制提供新信息。结果表明，高于 70 mmol/L 的铝对 RS1 生长产生抑制 作用，0 ~ 70 mmol/L 铝处理后细胞壁主要组分甘露糖和葡聚糖含量都没有显著改变，而细胞壁磷含量在 70 mmol/L 铝 处理后显著升高。在高铝处理时，糖蛋白抑制剂抗生素衣霉素(tunicamycin)极大加重 RS1 的铝毒害。由此说明，细胞 壁多糖组分含量并不对 RS1 高耐铝起到主要作用，细胞壁结构修饰如细胞壁磷含量响应和细胞壁 N 连接的糖蛋白修 饰在 RS1 高耐铝中可能起到一定作用。 关键词：红酵母；铝毒；细胞壁；甘露糖蛋白 中图分类号：S154.3 文献标识码：A 当土壤 pH 低于 5 时，铝(Al)主要以毒性 Al3+ 形 的机械强度[18] ；甘露糖蛋白位于细胞壁表面，并广 式存在，是酸性土壤中对植物和微生物造成毒害的主 泛被 O(丝氨酸或苏氨酸)和 N( 天冬酰胺)糖基化修 要因子之一[1–3] 。对植物的耐铝机制研究较多，其耐 饰，决定了细胞壁的疏水性、电荷及对溶质分子的 铝机制主要包括外部排斥和内部耐受[4–6] 。同时，在 透过性[19] 。酿酒酵母中与囊泡运输和蛋白甘露糖基 酸性土壤中存在着高耐铝微生物，相对植物，耐铝微 化有关的基因缺失后，酵母细胞壁结构受到影响， 生物可以耐受高达 100 mmol/L 的铝[7–9]。相对于培养 突变体对铝更为敏感，说明细胞壁相关组分及其代 基中高浓度铝，耐铝微生物能保持细胞极低铝浓度， 谢在酵母耐铝中起到作用[20] 。细胞壁糖蛋白抑制剂 说明高耐铝微生物主要通过有效地将铝屏蔽于细胞 衣霉素，作为一种抗生素，其对酵母进行处理后能 外达到解铝毒目的[10–11]，但关于微生物屏蔽铝的具体 够抑制甘露糖 N 连接的糖基化修饰，会影响到细胞 机制并不清楚。对于进入到细胞质内的铝，微生物主 壁甘露糖蛋白组成及结构 [21] ，进而可能会影响到 要通过有机酸或其他螯合物质与铝螯合减轻细胞内 RS1 耐铝性。 铝毒害[12–13]。同时微生物生长快、周期短、易变异、 在本实验室前期研究及相关文献的基础上[15–21]， 单细胞等特点为铝毒研究提供了便利，其高耐铝机制 本文进一步研究了细胞壁在 RS1 高耐铝中的作用， 的阐明也可为植物耐铝机制提供借鉴，在未来有望应 并用糖蛋白抑制剂衣霉素处理细胞，以期阐明细胞壁 用于改良酸性土壤和改善生态环境[14]。 组分在 RS1 耐铝中的作用。 本实验室前期在江西鹰潭酸性油茶土壤中筛 选得到一株高耐铝红酵母 RS1 ，可以在 200 mmol/L 1 材料与方法 铝下生长，并发现高浓度铝处理下 RS1 细胞壁增 1.1 试验材料 厚，这种响应机制可能对 RS1 耐高浓度铝起到重要 采用红酵母 Rhodotorula taiwane