《医学分子生物学原理》第二章 真核基因表达与调控.pptVIP

真核基因表达调控的基本特点 （管家基因）组成性表达；（奢侈基因）可变性表达（诱导和阻遏） 时间（发育相关性）和空间特异性（组织细胞相关性） 正性调控为主 真核生物的顺式作用元件包括三类： Ⅰ类顺式作用元件——Ⅰ类启动子——RNA pol Ⅰ Ⅱ类顺式作用元件——Ⅱ类启动子——RNA pol Ⅱ Ⅲ类顺式作用元件—— Ⅲ类启动子——RNA pol Ⅲ Ⅱ类顺式作用元件调控的基因主要是编码蛋白质的基因，少数是snRNA基因。 Ⅱ类顺式作用元件包括： 核心启动子( Core promoter)，增强子(enhancer)，沉默子（silencer ），及各种反应元件等。 1. 核心启动子( Core promoter) Ⅱ类启动子的核心启动子常由TATA盒、位于TATA盒上游的的上游启动子元件、以转录点为中心的起始子和下游启动子元件，4个元件组合而成。 一般位于转录起始点的-60 bp~ +40 bp 。 通常一个基因的核心启动子只含有2个或3个元件。 ⑴ TATA盒 (TATA box) Ⅱ类启动子的TATA盒其中最主要的结构，位于转录起始点上游-30bp处； TATA盒和部分上游启动子元件组成；是TF ⅡD识别部位。一般是含TATA序列的6-7 bp的核心序列： TATA(A/T)(A/T)，在不同基因中有差异 但某些Ⅱ类基因无TATA盒，如管家基因等； 功能：确保转录精确而有效地从转录起始序列开始 ⑵起始子(initiator, inr) 以转录点为中心的的保守序列， 共有序列为PyPyAN(A/T) PyPy，Py-嘧啶， 功能：是某些基因最佳转录所需的 ⑷上游启动子元件 (down stream promotor element, DPE) 概念：是一些位于TATA盒上游的可调节基因转录DNA序列。 主要包括： 1）CAAT盒 能与CAAT结合转录因子（CTF）和CAAT/增强子结合蛋白（C/EBP）结合 2）GC盒 以CCGCCAAT为序列特征，能与反式作用因子Sp1结合。 特点：一般位于启始位点-40~-110bp之间，有方向性并与距离有关。 作用机制：调节TATA因子与TATA的结合、 RNA pol Ⅱ与启动子的结合、转录起始复合物的形成等。 2. 增强子 概念：能增强启动子活性的DNA序列。 特点： 1）能远距离增强启动子的活性； 2）无方向性，在启动子的上游和下游均起作用； 3）对启动子的影响无严格的专一性。 作用机制：可能通过与某些调节蛋白的结合改变染色质的结构而发挥作用。 3. 反应元件 概念：能抑制启动子活性的DNA序列。 特点：与增强子相似；沉默子与增强子的角色可因调控基因而转换。 （一） 反式作用因子的主要特点 一般具有三个结构域：DNA识别结构域、转录活性域和蛋白质-蛋白相互作用结构域； 能识别并结合调控区的顺式作用元件； 对基因表达有正性调节（激活）和负性调节（抑制）二种方式。 其调节机制涉及顺式作用元件、RNA聚合酶和其它调节蛋白。 在亮氨酸拉链近N-端有富含碱性(带正电荷)氨基酸残基的区域，是DNA的结合区。 3. 碱性螺旋-环-螺旋 RNA聚合酶III的转录起始 （四）转录起始调控模式 表达式调节: 需要时才合成, 随即被降解; 共价修饰: 作用时间较长，常见有磷酸化/去磷酸化、糖基化，都作用于Ser和Thr，有竞争排斥； 配体结合：如激素受体类反式作用因子，只有当与激素结合才有活性； 蛋白质-蛋白质相互作用：如碱性亮氨酸拉链的二异聚体化 2. 反式作用因子与顺式作用元件的结合 多数：先激活后结合; 少数：先结合后激活。 4. 中介因子对转录起始的调控 某些反式作用因子是间接通过中介因子起作用 5. 多重增强子作用 金属硫蛋白基因：有4个金属反应元件，2个基础水平增强子（与激活蛋白AP1反应），1个糖皮质激素反应元件，这些增强子不同组合产生不同效应； 组合式基因调控：有限的反式作用因子，可以通过不同组合调控不同基因表达。 三、转录后调控 5′帽子结构的作用： 防止mRNA被5′→ 3′核酸酶降解； 能被帽结合蛋白识别，增强mRNA的可翻译性，没帽子结构，翻译效率降低； 促进mRNA从核到胞浆的运输过程； 增强mRNA的剪接效率, 帽对exon1的剪接尤为重要，需要2个帽结合蛋白参与（CBP80和CBP20） Poly(A)尾的作用 延长mRNA的半衰期限： 实际上是一个核酸水解酶降解与Poly(A)聚合酶不断添加A的一种平衡，总趋势是胞浆内Poly(A)逐渐缩短。 促进翻译效率： Poly(A)与Poly(A)结合蛋白（PABP）结合； 人为除去二者或其一，均降低翻