除草剂草丁膦抗性基因bar作为三角褐指藻基因工程选择标记.PDF

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2017-07-04 发布于江苏
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除草剂草丁膦抗性基因bar作为三角褐指藻基因工程选择标记

bar 1,2 2 2, 3 1 2 , , , , (1. , 210095; 2. , 266071; 3. , 100049) 摘要: 研究了三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)对氯霉素、卡那霉素、青霉素、链霉素、潮霉素 5 种抗生素和一种除草剂草丁膦的敏感性, 发现三角褐指藻对草丁膦非常敏感, 用统计学分析法得出了其72 h 半致死质量浓度为22 mg/L 。通过基因枪法将携带草丁膦抗性基因bar 的载体pSVB 导入三角褐指藻细胞中, 通过草丁膦筛选成功获得了抗性藻细胞, PCR 检测获得阳性结果, 提示草丁膦更适合用于构建安全、高效、廉价的三角褐指藻表达系统。关键词: 三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum); 草丁膦; bar 基因; 基因工程; 选择标记中图分类号: Q 943.2 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2010)05-0062-05 , , f/2 [15] [1,2] pSVB , bar SV40 , (Phaeodactylum tricornutum) , ( 1), [3], () [4, 5] , [6~9] , [10, 11], [12, 13] , , 1 pSVB (4131bp) Zeocin Fig. 1 Construction of plasmids pSVB [4,5], Zeocin , sh ble 1.2 试剂、仪器与耗材 , Zeocin , DNA [14], 5 , 5 [16] 0.22 μm 20 ℃ (phosphinothricin, PPT) (); Sourthern , , DNA bar, , Roche ; PDS-1000/HeDNA : 2009-06-06; : 2009-10-08 1 材料和方法 : 863 (2006AA100311402);