重组腺病毒介导的野生型p53基因对HepG2细胞抑制作用的研究.pdfVIP

江西中医学院学报2007年1 2月第1 9卷第6期 JOURNAL OFJlPu~GXI UNIVERSITYOFTCM2007 Vo1．19 No．6 重组腺病毒介导的野生 制作用的研究* ★ 田耕 刘积良 董洪松 陈伟红 谭淑瑶 深圳518035) 摘要：目的：研究重组腺病毒介导的野生型053基因对人 053腺病毒(Ad一053)在不同感染滴度、不同感染时间对人J HepG2细胞的凋亡率；采用瘤内注射的方法观察Ad一053 制效应，效靶比(MOI)越高、作用时间越长，抑制作用越强 转导显著增加了HepG2细胞的凋亡率；瘤内注射Ad-053 HepG2细胞有明显的抑制效应，其抑制效应具有时间、剂{ 因治疗途径。 关键词：肝癌；腺病毒；053；基因治疗 中图分类号：R 394233；R 73．23；R 735．7 文献标识码 TIAN Geng，LIU Ji-li~g，D0NG Hong-Song，CHEN Wei-Hong，TAN Shu-Yu The Shenzhen Affiliated Hospital ofSo~th Med~aZ UniversityShenzhen Second People’ Hospita1．Shenzhen 518035 Abstract：Objective：To explore the potential LISe of adenovirus mediated 053 gene(Ad一053)therapy for hepatocellular cardnoma．Methods：A human hepatocellular cB．rcinon~cell line HepG2 was used．Recombinant adenovirus c~rrying wild—type 053 gene Was transfected into HepG2 cells in vitro and injected into tumor nodules in vivo．The growth of HepG2 cells in vitm and estab— lished hepatocellular carcinoma nodules in nude mice Was examined．Cdl apoptosis Was analysed by Annexin-V／PI labeling flow cytom— etry method．Results：Cell growth Was greatly suppressed at≥125MOI．053 transfection can increase HepG2 cells apoposis rate．In vivo studies，intratumoral iniection ofAd-053 significantly inhibited hepatocelMar carcinoma implanted xenograft．Conclusion-Transfection of wild—type 053 gene via Ad一053 is a potential approach to the therapy of hepatocellular carcinoma． Key words．．Hepatocellular Carcinoma；Adenovirus；053；Gene therapy 原发肝细胞性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，因其恶 讨重组人p53腺病毒(Ad一053)对人肝癌HepG2细胞的抑制 性程度高、预后差，目前临床采用的多种传统治疗手段都不． 作用，现报告如下。 能收到满意的效果。p53基因在肝癌细胞中的突变率达 1 材料与方法 50％以上uj，是肝癌细胞中突变频率最高的基因，因此成为 1．1 材料 重组腺病毒介导p53基因(Ad一053)由深圳市赛 肝癌基因治疗的最佳靶点之一。腺病毒DNA不整合到宿主 百诺基因技术有限公司提供，对照病毒Ad-LacZ由中山大学 细胞基因组中，对人体无遗传毒性，作为基因载体既可感染 医学院伍庄博士惠赠。人肝癌细胞株HepG2(内源性表达 处于分裂状态的细胞，也可感染静息期细胞。本研究旨在探 野生型p53)由中山大学医学院伍庄博士惠赠，细胞在RPMI