食品理化检验氨基酸及蛋白质剖析.pptVIP

消化具体操作 ①准确称取样品，置于凯氏烧瓶中； ②加入硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸摇匀； ③置于电炉上，成45度角，小火加热。 ④待泡沫停止后，加大火力，保持微沸，至液体变蓝绿色透明，再继续加热0.5～1h， ⑤取下冷却后，小心加入水，转移至1000ml容量瓶，定容，作为样品液备用，同时做空白试验。 ②蒸馏 按图安装好微量定氮蒸馏装置; 于水蒸气发生瓶内装水至2/3容积处，加甲基红指示剂数滴及硫酸数毫升，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 在接受瓶内加入硼酸及2滴混合指示剂，将冷凝管下端插入液面以下。 2NaOH＋ (NH4)2SO4＝2NH3↑＋ Na2SO4 ＋ 2H2O 用硼酸吸收，用盐酸标准溶液滴定至灰色为终点 指示剂：混合指示剂（甲基红—溴甲酚绿） 指示剂 红色 绿色 红色 （酸） （碱） （酸） ③ 吸收与滴定 2NH3 + 4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3 计 算 X = X为样品中蛋白质的含量 V1为样品消耗盐酸标准液的体积 V2为试剂空白消耗盐酸标准液的体积 C为盐酸标准液