假单胞菌M18转录调节因子σS基因与无启动子lacZ 基因融合突变株的构建和鉴定.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # ’%( ) ’* 年 月 日 $%% % ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! +,-./01 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! $ 假单胞菌!# 转录调节因子 基因与无启动子 ! *$. 基因融合突变株的构建和鉴定 ， $ 葛宜和 ，许煜泉 （上海交通大学生命科学技术学院 上海 $%%$!% ） $ （鲁东大学生命科学学院 烟台 $!%$# ） 摘 要：通过菌落原位杂交和K.-I01F 杂交，从假单胞菌L4 基因组文库中克隆了!#$ 基因及相邻序列。为了深 入研究影响 基因表达的调控因素，运用同源重组技术，将无启动子 半乳糖苷酶基因（ ）插入并融合于 !#$ 5 5 M%’( ! 基因中，构建了假单胞菌 基因突变株 。 法测定显示，突变株 的 半乳糖苷酶可高 !#$ L4 !#$ L4KN L=7701 L4KN 5 ! 达 ，而野生株检测不到 半乳糖苷酶活性。表明，突变株中的 基因与无启动子 半乳糖苷酶基因已融合 !4%O 5 !#$ 5 ! ! 并且表达。在 培养基中生长量测定（ ）的结果表明，突变株与野生株生长存在显著差异。 PL2 )*%% 关键词：假单胞菌 ； ； ；插入突变；融合；鉴定 L4 !#$ %’( 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Q’4 3 %%%5$%( $%% %#5%’%(5%# 原核生物在不同生长时期和不同的环境胁迫因 假单胞菌L4 因其分泌两种抗生物质吩嗪55 子作用下，通过表达不同