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从甘油富集菌宏基因组中克隆甘油脱水酶基因

·52 · 微 生 物 学 通 报             2006年 33 ( 6) 从甘油富集菌宏基因组中克隆甘油脱水酶基因 1 1 2 1 1 1, 2 吴杰群  周文广  杨登峰  齐向辉  韦宇拓  黄 日波 ( ) 1 ( ) 2 广西大学生命科学与技术学院 南宁 530005   广西科学院 南宁 530022 摘要 : 采用一种简便快速的方法从经甘油富集培养的土样 中提取出质量较好宏基 因组 DNA 。然后以此 DNA 为模板 , 以扩增肺炎克雷伯氏菌 、弗氏柠檬酸菌和丁酸梭菌甘油脱水 酶基因的引物进行 PCR , 分别扩增出目的条带 , 并将其克隆至 T载体中。进行测序分析显 示 , PCR 扩增出来的片段与其引物相应的甘油脱水酶序列同源性分别达到 99% , 90%和 99% 。这表明克隆出来的这 3个基因为相应的甘油脱水酶基因。 关键词 : 宏基因组 , 甘油脱水酶 , 基因克隆 中图分类号 : Q781  文献标识码 : A   文章编号 : (2006) 060052 05 C long ing the Genes Encod ing Glycerol D ehydra ta se from M etagenom ic D NA 1 1 2 1 WU J ieQun  ZHOU W enGuang  YAN G D engFeng  Q I X iangHu i 1 1, 2 W E I YuTuo  HUAN G R iBo 1 ( Colleg e of L if e S cience, Guangx i Un iversit, N ann ing 530005) 2 ( Guangx i A cadem y of S cience, N ann ing 530022) Ab stract: A pure m etagenom ic DNA was extracted from the soil by a simp le, rap id m ethod From the m et agenom ic DNA , three different DNA fragm ents were successfu lly amp lified u sing the p rim ers of different glycerol dehydratase genes A

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