KLF5 在通心络抑制血管内膜增 生中的作用及机制.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………5 英文缩写………………………………………………………………10 研究论文 KLF5在通心络抑制血管内膜增生中的作用及机制 前言……………………………………………………………………11 材料与方法………………………………………………………12 结果………………………………………………………………22 附图………………………………………………………………26 讨论………………………………………………………………43 结论………………………………………………………………44 参考文献…………………………………………………………46 综述 TLRs 的研究进展………………………………………………48 致谢……………………………………………………………………58 个人简历………………………………………………………………59 万方数据 中 文 摘 要 KLF5 在通心络抑制血管内膜增生中的作用及机制 摘 要 目的：巨噬细胞的增殖和迁移在血管内皮损伤诱发的内膜增生中发挥 重要作用，因此，有效抑制巨噬细胞增殖和迁移对预治以血管内膜增生为 特征的血管重构性疾病具有重要意义。 Krüppel-like factor 5(KLF5)是具有锌指结构多功能转录因子，在心血 管、癌症等多种疾病中参与细胞增殖、迁移和凋亡的调控，然而，目前 KLF5 在巨噬细胞增殖和迁移中的作用及机制尚不十分清楚。 通心络 （Tongxinluo, TXL ）是根据络病理论研制的中药复方提取物， 因其具有良好的血管保护作用，故临床上广泛应用于心脑血管疾病的治 疗。近年虽然对通心络保护血管的作用机制进行了大量研究，但其抑制血 管重构与 KLF5 表达及巨噬细胞增殖、迁移之间的关系尚有待阐明。本研 究旨在探讨 KLF5 在通心络抑制巨噬细胞增殖、迁移及血管内膜增生中的 作用及分子机制，诱导的巨噬细胞增殖的抑制作用及其分子机制，以期为 通心络临床应用提供新的理论支持及实验依据。 方法：KLF5wt 和巨噬细胞敲除 KLF5 （KLF5ly -/- ）小鼠随机分为对照 组、颈动脉结扎组和颈动脉结扎+通心络治疗组，苏木精-伊红染色评价内 膜增生的形态学变化。免疫荧光双重染色观察 Mac-2 、KLF5 和 PCNA 表 达活性与观察巨噬细胞浸润及血管内膜增生的关系。 用 TNF-α 刺激体外培养的巨噬细胞 RAW264.7 ，触发巨噬细胞炎症的 炎症反应，同时给予通心络干预。Western bolt 检测巨噬细胞中 KLF5 和 PCNA 的表达；伤口愈合（划痕）实验观察巨噬细胞的迁移能力；MTS 测定巨噬细胞增殖活性。免疫共沉淀检测 KLF5 的苏素化/泛素化水平已 及 FBXW7 与 KLF5 之间的相互作用及相关的信号通路。 结果： 1 通心络通过抑制巨噬细胞增殖和迁移而减轻颈动脉结扎诱导的内 膜增生 将 C57BL/6J 小鼠随机分为对照组、颈动脉结扎组和颈动脉结扎+通 心络治疗组。苏木精-伊红染色结果显示，与对照组（Con ）相比，结扎 组（Ligated ）小鼠颈动脉内膜显著增生， 其 I/M 比值明显增加；而颈动 1 万方数据 中 文 摘 要 脉