中草药接骨膏促进骨折愈合作用实验研究.docVIP

中草药接骨膏促进骨折愈合作用实验研究中图分类号：R2文献标识码：A 文章编号：1008-925X（XX年，临床观察发现具有明显地活血化淤、消肿止痛、缩短骨折愈合时间的作用，目前已成为我院骨伤科治疗骨折的常用药。本实验旨在通过观察中草药接骨膏对兔骨折模型愈合过程的影响，进一步验证其促进骨折愈合的效果，并探讨其对促进骨折愈合的作用机理 一、材料与方法 1、药品试剂及器材 中草药接骨膏由独正杆(又名光葡萄、野葡萄、山葡萄，属葡萄属科蛇葡萄之变种光叶蛇葡萄)、刺老苞(又名刺苞头、鸟不踏、红刺苞头，属五甲科植物槐木)、刺五加(又名五加皮、刺加皮)组成。以上3味药均分别取根皮晒干，捣碎或切成小块，按独正杆∶刺五加∶刺老苞=2∶1∶1的比例混合加水煎煮，采用膏滋法置备成煎膏剂（每毫升含生药1g），成品为棕色稠膏，味甜微苦；骨折挫伤散，中成药，由中国佳木斯制药厂生产(批号001206)；生化分析仪OLYMPUSAU400，日本；切片机LeicaJungBiocut2035德国；AXIOSKOP2PLUS光学显微镜,德国ZEISS公司 2、动物及分组大耳白色家兔72只，全部雄性，体重（1.8±0.5）kg，湖北民族学院动物实验中心提供。对家兔随机分为3组，即模型对照组（以下简称对照组）、接骨膏实验组（以下简称实验组）、骨折挫伤散治疗组（以下简称治疗组），每组24只 3、动物模型制备及检测方法3组实验动物均在戊巴比妥钠的麻醉下，按无菌操作术切开家兔右后腿，作胫腓骨中段横形骨折，再用克氏针内固定，缝合伤口。术后进行3?d（给予庆大霉素4万单位肌肉注射，1次/d）抗感染治疗，以防感染。造模成功后次日起灌胃给药进行实验研究。实验组采用接骨膏煎膏剂按3.0g/kgbw剂量灌胃给药，1次/d，相当于正常成人剂量5倍；治疗组采用骨折挫伤散按3.0g/kgbw剂量用蒸馏水调成混悬液灌胃治疗，1次/d，相当于正常人剂量5倍；对照组采用等容积（5?ml）的生理盐水灌胃。在实验研究过程中的第7，15，30天，每组随机抽取家兔8只，先行X线观察骨痂阴影的形成和血清学检测，再用空气栓塞法处死，作病理组织学检查观察骨折处组织愈合程度。X线拍片判断采用5分制标准：（0分）未发现骨痂阴影；（1分）可见到骨痂阴影，骨折线比较模糊；（2分）有明显骨痂生长，骨折线显著模糊；（3分）有丰富骨痂生长，骨折线接近消失；（4分）骨折线消失，完全连接，接近骨化。血清学检测：抽取各组中家兔空腹血5ml，用生化分析仪直接测定血清碱性磷酸酶(AKP)、血钙（Ca）、血磷（P）的含量；病理组织学检查：动物按计划处死后，切取包括骨质缺损两端的大体标本，经脱钙后常规处理标本，行石蜡切片，用HE、Masson、PTAH3种染色，观察骨缺损处血肿、细胞、胶原和新生骨情况 4、数据分析 实验数据采用SPSS FOR WINDOWS?11.5软件进行t检验统计处理 二、结果 1、X线拍片观察与对照组比较，实验组和治疗组骨缺损处骨痂阴影均出现早，?骨痂生长速度快，骨痂阴影密度高(P0.05)。结果见表1。表1接骨膏对家兔骨折愈合的影响(略) 2、对血清碱性磷酸酶(AKP)的影响造模后实验观察第7天，实验组和治疗组血AKP活性与对照组比较无明显差异；造模后第15，30天，实验组和治疗组血AKP活性升高与对照组比较差异显著(P0.05或P0.01)，且实验组和治疗组之间无差异性。结果见表2。表2接骨膏对血清碱性磷酸酶(AKP)的影响(略) 3、对血钙(Ca)、磷(P)的影响造模后实验观察第7天，实验组和治疗组血Ca含量的降低、血P含量的升高及Ca，P乘积等指标均有明显变化，但与对照组比较无统计学意义；造模后15，30?d，实验组和治疗组血Ca含量仍处于较低水平，但血P含量明显的升高和Ca，P乘积值的增大与对照组比较差异显著(P0.05)。结果见表3。表3接骨膏对血钙(Ca)、磷(P)的影响（略） 4病理组织学检查 切片检查发现实验组和治疗组动物两骨端生长新骨的时间较早，软骨区范围大，软骨内成骨过程较快；对照组两骨端出现新骨的时间较晚，软骨区范围较大，软骨内成骨过程较长，因而骨痂生长缓慢，直到第30天两端骨痂均不能连接，中间仍存在着大片纤维组织区 三、讨论 骨折愈合过程是一个复杂的组织学、生物学、神经内分泌学及骨生物力学的动态过程。临床上，各种原因所致的骨折延迟愈合和骨折不愈合是常见病。中草药接骨膏主要用于闭合性骨折早中期的治疗，方中药物功用：?独正杆祛风活络、止痛止血、散热解毒、强筋健骨；刺老苞活血止痛、散淤消肿；?刺五加祛风除湿、接骨续筋。此方配伍符合骨折治疗淤去、新生、骨合的传统理论。本实验我们采用了X线观察，了解对骨痂形成的影响；病理组