巨噬细胞耗竭对CCL4诱导的小鼠急性肝损伤与慢性肝纤维化自然恢复的影响.pdfVIP

中 文 摘 要 巨噬细胞耗竭对CCL 诱导的小鼠急性肝损伤与慢性肝纤维化 4 自然恢复的影响 摘 要 目的：研究巨噬细胞耗竭对CCL 诱导的小鼠急性肝损伤与慢性肝纤 4 维化自然恢复的影响 方法： 1 巨噬细胞耗竭对CCL 诱导的小鼠急性肝损伤的影响：15只雄性 4 BALB/c小鼠（23.70±2.43 ）g,随机分为3组，即：对照组（ip Oil ，n=5 ）， 未耗竭巨噬细胞的模型组(iv PBS ,ip CCL ，n=5)，耗竭巨噬细胞的实验 4 组(iv Clodronate - Liposomal ，CL ,ip CCL ，n=5)。我们的实验是基于Van 4 Rooijen对氯膦酸二钠脂质体的报道, 报道指出静脉内注射氯膦酸二钠脂 质体可以选择性的清除体内巨噬细胞, 巨噬细胞通过吞噬作用摄取脂质 体, 其膦脂酶破坏脂质体的膦脂双分子层, 药物在细胞内释放从而诱导了 [1] 巨噬细胞的凋亡 。在实验第一天模型组小鼠于尾静脉注射PBS 150 μl,实 验组小鼠于尾静脉注射CL 150 μL，对照组不做处理。尾静脉注射12h后进 行CCL 或Oil 的腹腔注射，模型组与实验组均腹腔注射5% CCL4 0.6 μl/g， 4 对照组腹腔注射橄榄油（Oil ）0.6 μl/g。24h后处死所有小鼠，分离血清-80℃ 保存以备检测丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT ）、天冬 氨酸氨基转移酶（Aspartate transaminase，AST ）、总胆红素（total bilirubin ， TBIL ）；取部分肝左叶切成条状放入4%多聚甲醛固定，用于HE染色和免 疫组织化学巨噬细胞（F4/80+ ）的检测，并采用IPP 图像分析软件检测累 3 积光密度值（IOD ）；其余肝组织切成125 mm 的小块-80℃冰箱保存， 用于RT-PCR检测一氧化氮合酶（iNos ）、趋化因子16 （CXCL16 ）的mRNA 表达水平。 2 巨噬细胞耗竭对CCL 诱导的小鼠慢肝纤维化自然恢复的影响：9只 4 雄性BALB/c小鼠（26.19±4.23 ）g,随机分为3组，即对照组（ip Oil，n=3 ）， 未耗竭巨噬细胞的模型组(iv PBS ,ip CCL ，n=3) ，耗竭巨噬细胞的实验组 4 (iv CL ,ip CCL ，n=3) 。模型组与实验组小鼠均进行腹腔注射5% CCL 0.6μl 4 4 /g 2次/周，对照组腹腔注射Oil 0.6 μl/g 2次/周，4周后停止。停止注射CCL4 1 万方数据 中 文 摘 要 后模型组小鼠于尾静脉注射PBS 150