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pPIC3.5K酵母表达载体说明.pdf
pPIC3.5K
编号 载体名称
北京华越洋生物VECT2690 pPIC3.5K
载体基本信息
出品公司: Invitrogen
载体名称: pPIC3.5K, pPIC 3.5K
质粒类型: 毕赤酵母蛋白表达载体
表达水平: 高拷贝
启动子: AOX1
克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶
载体大小: 9004 bp
5 测序引物及序列: 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´
3 测序引物及序列: 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
载体标签: /
载体抗性: Ampicillin
筛选标记: HIS4
备注: 插入基因是必需包含起始密码子ATG 。
产品目录号: K173-20
稳定性: 稳定 Stable
组成型: 组成型 Constitutive
病毒/非病毒: 非病毒
载体质粒图谱和多克隆位点信息
pPIC3.5K 多克隆位点
载体简介
pPIC3.5K 是一个鉴定多拷贝基因插入到毕赤酵母基因组中的载体。
1. pPIC3.5K 载体大小为9004 bp 。
2. 在多克隆位点区域，拥有5 个单一的限制性酶切位点：BamH I，Snab I，EcoR I，Avr II 和
Not I。
3. 胞内表达。
4. 载体构建时，需要包含一个ATG 启动子，同时需要加入Kozak 序列。 (Cavener and Stuart,
1991; Kozak, 1987; Kozak, 1990)
5. 毕赤酵母中使用HIS4 基因筛选。
6. 将基因插入GS115 和KM71 的AOX1 中，需要使用Sac I 线性化质粒(GS115 产生的基因型为
His+ Mut+，KM71 酵母产生的基因型为His+ MutS)。
7. 将基因插入GS115 和KM71 的HIS4 中，需要使用Sal I 线性化质粒(GS115 产生的基因型为
His+ Mut+，KM71 酵母产生的基因型为His+ MutS)。
8. 将基因插入GS115 的AOX1 基因中，也可以使用Bgl II 限制酶线性化质粒，产生的酵母基因
型为His+ MutS。
载体序列
ORIGIN
1 AGATCTAACA TCCAAAGACG AAAGGTTGAA TGAAACCTTT TTGCCATCCG
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