药检 项目五.ppt

任务一 复方丹参滴丸冰片的鉴别 项目三 药物的鉴别 主要内容 水蒸气的影响 在吸附薄层色谱的展开过程中，空气的相对湿度以及展开槽中的水蒸气必须严格控制，微量的水也能对色谱分离结果产生较大的影响。 硅胶薄层板吸附水蒸气的速度很快，0.25mm厚、20×20cm的薄层板在50%相对湿度中约3分钟就失去活性的一半，而15分钟时吸附的水分已达到最大值，因此，点样速度的快慢，空气相对湿度的大小，都可以影响分离以及重现性。 适宜的相对湿度范围也决定于溶质和溶剂的极性。 溶剂蒸气的影响 “边缘效应”：Stahl在用氯仿-甲醇（95：5）为展开剂展开麦角生物碱时发现，对同一种生物碱，在薄层板中部的Rf值比在边缘的Rf值小，称此现象为“边缘效应”（edge effect）。 展开槽中被展开剂蒸气饱和后再进行展开就可以消除。 展距对结果的影响，硅胶HPTLC 分离洋甘菊油，a）3 cm、b）5 cm、c）7 cm、d）9 cm。 举例 如异烟肼中游离肼的检查： 肼是一种诱变剂和致癌物质，中国药典对异烟肼原料和注射用异烟肼中游离肼的检查均采用薄层色谱法。 检查方法　取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相当于游离肼50μg）的溶液，作为对照溶液。吸取供试液10μl 与对照溶液2μl，分别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇－丙酮（3:2）为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15min后检视，在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。 取本品水蜜丸6g，研碎，或取小蜜丸或大蜜丸9g，切碎，加硅藻土4g，研匀。加乙醚40ml，低温回流1小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以环己烷－醋酸乙酯(3:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性 5％三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。 （2005年版《中国药典》一部 401页） 判断依据：Rf值、Rs值 1、查找资料：影响Rf值的因素 吸附剂种类、活度、颗粒大小；展开剂纯度和极性；薄层厚度；点样量；展开方式、温湿度；展开槽中的预饱和状态等。 2、对照品比较法：常用。 （一）定性鉴别 检验-结果 薄层色谱展开示意图 被分离混合物 组分一 组分二 1、对照品比较法： 杂质对照品制成一定浓度的溶液 样品制成一定浓度溶液 按相同的点样量点样 展开后观察斑点颜色深浅和大小 （二）杂质检查（杂质限量检查） 检验-结果 仪器 托盘天平 玻璃板（5×15cm） 研钵 量筒（25ml） 制备 研磨 ?硅胶G 1份 0.5%CMC-Na溶液3份 晾干 活化：110℃/30min 本实验实行过程—对照品比较法 仪器：分析天平（感量0.1mg）、超声波仪、研钵、量筒（25ml）、容量瓶（100ml）、烧杯、漏斗、玻棒等 供试液的制备：取本品40丸，研细，加无水乙醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。 对照液的制备：另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。 本实验实行过程 2、自身稀释对比法（杂质结构不明或无杂质对照品） 样品溶液稀释制成一定浓度的溶液 样品制成一定浓度溶液 按相同的点样量点样 展开后观察斑点颜色深浅和大小 如地西泮中有关物质的检查： 取本品的细粉适量（约相当于地西泮200mg），加丙酮5ml,振摇，使地西泮溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；精密量取适量，加丙酮稀释成每1ml中含地西泮0.20mg的溶液，作为对照溶液。点样展开后，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 3、目视比较法： 对照品制成不同浓度的系列溶液 样品制成定量溶液 按相同的点样量点样 展开后观察斑点颜色深浅和大小 注：本法适用于近似含量的测定，误差±10% 4、斑点洗脱法 对照品制成溶液 点于薄板两侧 样品制成一定浓度溶液 线状点于薄板起始线中间部分 展开 对对照品显色，以此为依 据刮下含有样品的吸附剂 将样品溶解，按照分光光度法测定溶液浓度 注：本法适用于含量的测定 六味地黄丸中丹皮酚的薄层鉴别 应用实例 3、知识拓展 1.丹皮酚； 2～5.六味地黄丸 六味地黄丸