管理课件螺旋藻抗紫外辐射诱变效果的探索.pdf

螺旋藻抗紫外辐射诱变效果的探索 方友嘉，梅 梅，蒙伟能 厦门大学生命科学学院 （361005） E-Mail: youjia.fang@ 摘要 本实验采用物理诱变剂UV诱变果蝇，然后以不同浓度的螺旋藻培养基和空白对照培 养基喂养果蝇，通过对比不同实验条件下果蝇的生殖能力及后代的存活能力的差异，研究螺 旋藻抗紫外辐射诱变的效果。 关键词 螺旋藻 紫外线 物理诱变剂 果蝇 1.引言 现代医学证明：螺旋藻作为地球上最古老的植物，含有丰富的蛋白质、氨基酸、多糖、 不饱和脂肪酸、胡罗卜素、藻篮等多种维生素、矿物质和微量元素。 螺旋藻含有一种特殊 的光合色素蛋白— — 藻蓝蛋白，能够提高人体抵抗辐射的能力，避免电视机、微波炉、电脑、 手提电话等物品所带来的辐射伤害。 2. 实验原理 2.1 物理诱变剂— — 紫外线 紫外线是波长136~390 毫微米的短于紫外波长的射线，它是一种非电离辐射，能使被照 射物质的分子或原子中的内层电子提高能级跃迁到能量高的外层轨道 （称为激发），导致分 子的理化变化。DNA 分子上的碱基对强烈吸收紫外线，而且嘧啶比嘌呤敏感 100 倍。紫外 线辐射能引起DNA 链的断裂、DNA 分子内和分子间的交联、核酸与蛋白质的交联，以及胞 嘧啶和尿嘧啶的水合作用等，但最主要的则是形成嘧啶二聚体，他会阻碍双链的解链和复制， 阻碍碱基的正常配对，从而导致基因突变。它的遗传效应主要是引起 GC→AT 的转换或移 码突变。由于存在光复活作用，即白光照射能活化光激活酶并将嘧啶二聚体解开而使 DNA 恢复正常，故辐照和处理后的培养应避免可见光照射 （应在红光下操作）。 2.2 果蝇诱变试验 果蝇诱变试验已广泛用于对环境污染物、农药、药物，食品添加剂、辐射食品和化妆品 等的遗传毒理检测，是目前整体测试试验中，能检出从隐性致死突变、隐性可见突变、小缺 失、染色体易位和丢失，直至染色体不分离和重组等多种遗传损伤的最简便、快速、经济的 筛选方法。 2.3 果蝇生活史 雌果蝇一般在羽化后12 小时开始交配，交配后两天开始产卵。卵 孵化成幼虫后要经过两次脱皮才能从一龄幼虫变为三龄幼虫，幼虫生 活6—7 天准备化蛹，化蛹之前从培养基中爬出来附着在瓶壁上或附着 在培养基中的滤纸片上，逐渐形成一个梭形的蛹，幼虫在蛹壳内完成 成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳的前端爬出来。 - 1 - 3. 实验准备阶段 3.1 普通玉米培养基的配制 果蝇幼虫是以酵母菌作为主要食料的。本次实验采用玉米饲料作为果蝇的饲料。玉米饲 [1] 料成分 见 表1： 表1 玉米饲料配方 成分 水 琼脂粉 蔗糖 玉米粉 酵母粉 丙酸 (mL) (g) (g) (g) (g) (mL) 用量 150 1.5 13 17 1.4 1 配制过程： 首先称量相对应质量的琼脂粉，蔗糖和玉米粉一起倒入塑料盆中，加170mL水 （本次实 验加170mL蒸馏水煮沸蒸发后大概剩150mL），稍微搅拌，放入微波炉中加热，煮沸后搅拌 成糊状，待冷却到 80℃后再加入酵母粉和丙酸 （丙酸作用是抑制霉菌污染），再次搅拌均 匀。分装入三角瓶中 （用玻璃棒引流），每瓶大约 20ml，待培养基冷却，用棉花擦去三角 瓶壁上的水珠，再塞上棉塞。 3.2 果蝇成蝇的麻醉 本次实验在分处女蝇、照紫外、解剖镜观察和转移瓶子等都用到麻醉得方法。将装有成 蝇的三角瓶的瓶口与麻醉瓶 （一个空的干净的三角瓶）的瓶口对接，若培养基比较硬时，可 把装有成蝇的三角瓶颠倒与麻醉瓶上，直接拍打麻醉瓶底，便于快速把成蝇振下来