酶的别构调控.ppt

——ATCase 酶活性的调节机制之别构调控 C O N T E N T S ATCase(aspartate transcarbamylase ) ?嘧啶途径的终产物反馈抑制ATCase ? ATCase由催化亚基和调节亚基构成 ? ATCase及其与双底物类似物PALA复合物的三维结构 ? ATCase的别构作用通过四级结构大的变化来转达 ?底物结合到ATCase上引起高度协同的别构转变 ?ATP和CTP通过改变T和R态之间的平衡来调节ATCase的活性 1.嘧啶途径的终产物反馈抑制ATCase(天冬氨酸转氨甲酰酶） 1.嘧啶途径的终产物反馈抑制ATCase(天冬氨酸转氨甲酰酶） positive effector 正效应物 nedative effector 负效应物 homotropic effect 同促效应 heterotropic effect异促效应 CTP和ATP对ATCase调节的生物学意义 2.ATCase由催化亚基和调节亚基构成 汞化合物可使ATCase解离成两种亚基。 天然酶 11.6S 解离的亚基： 大的亚基为催化亚基5.8S 小的亚基为调节亚基2.8S 含有三条c链 含有两条r链 催化亚基和调节亚基混合时可迅速结合，得到的复合物具有天然酶相同的结构 2.ATCase由催化亚基和调节亚基构成 天然酶 （含有2个催化亚基，3个调节亚基） 3.ATCase及其与双底物类似物PALA复合物的三维结构 3个完全相等的cr单位，彼此的关系是旋转120度。 每一个在外周的r链上有2个结构域。 3.ATCase及其与双底物类似物PALA复合物的三维结构 A.Asp的氨基亲核攻击氨甲酰磷酸的羰基碳原子 B.过渡态 C.PALA类似于一对结合的底物和过渡态 含有PALA的ATCase的X射线晶体结构分析证明6个活性部位中的每一个都位于催化链之间的界面附近 4.ATCase的别构作用通过四级结构大的变化来转达 无配基的T态 有配基的R态 同时，PALA的结合也导致了每一条催化链的三级结构的重要变化 4.ATCase的别构作用通过四级结构大的变化来转达 注：绞链的移动导致两个结构域更靠近。氨甲酰磷酸结构域与天冬氨酸结构域相比变化较小 两种底物的结合导致这些结构域靠近0.2nm，引起构象的转变。 由230-245残基组成的称为240s环在这个转化过程中经历了较大的重定向。其转动释放几个基团，使它们能够与底物相互作用并促进催化 值得一提的是，ATCase的别构效应是在相当大的立体范围内起着调节活性作用。 5.底物结合到ATCase上引起高度协同的别构改变 以硝基酪氨酸吸收光谱的变化作为证据，证明底物类似物结合到一个三聚体的活性部位就能改变另外三聚体的结构 6.ATP和CTP通过改变T和R态之间的平衡来调节ATCase的活性 与上个实验原理类似，正常的调节亚基同含有硝基酪氨酸的催化亚基结合形成杂合ATCase。 在没有底物的情况下，加入ATP，430nm吸收增加；加入CTP则430nm吸收降低。 由此， 别构激活剂ATP使平衡向R型改变； 别构抑制剂CTP是平衡向T型改变 THANKS FOR LISTENING!