稀土离子Eu3对牛血清白蛋白作用的拉曼光谱研究论文.pdf

第24卷，第11期 光谱学与光谱分析 0 and 20 4年11月 Sp薯_t工os∞pySpectralAnalysis Noverr|ther，2004 稀土离子Eu3+对牛血清白蛋白作用的拉曼光谱研究 赵雨，陈心智，曲晓波，赵大庆‘ 长春中医学院新药研发中心，吉林长春130117 摘要研究了稀土离子El?+对牛血清白蛋白二级结构的影响。结果表明稀土离子加入后，醅氨酸的微环 境没有改变，但稀土离子可能与暴露的色氨酸残基吲哚环作用。当稀土离子浓度较低时，主要和Trp-3作 用，随着离子浓度升高，稀土离子可能进一步和Trp-158发生作用。牛血清白蛋白4一螺旋的含量随着稀土离 子浓度的升高而降低，同时无规卷曲的含量逐渐升高。 主题词拉曼光谱；牛血清白蛋白；稀土离子 中图分类号：(3657．3文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2004)11—0213—02 蛋白质是由氨基酸构成的．两个氨基酸相互连接的部分 露式”和“埋藏式”的比例。N堆和N·分别为处于“暴露式”和 —。[矾}卜称酰胺基团或肽键，酰胺谱带的位置和强度与蛋 “埋藏式”的酪氨酸占蛋白质中酪氯酸总残基数的比例。 白质的二级结构密切相关¨3。同时一些氨基酸的侧链基团 Ⅳ簋+N·=1 可以在拉曼光谱中出现特征谱带，这些边链振动谱带往往是 0．5N4+1．25N-=I蝴“船0 结构灵敏的，研究它们也可以得到蛋白质的结构信息‘“。 我们计算了稀土离子加人后830cITl。1和850锄一1两个 峰强度比的变化情况(表1)。 1材料与方法 of Table1 TheelfeetE一+Oilthemicrmnvh--onment 稀土氧化物(纯度大于99．9％，上海跃农化工厂)溶于盐 for tyraslne 酸后，除去过量酶，调节pH值至7．0，浓度用EDTA标定； 牛血清白蛋白(纯度99％，Sigma公司)溶于不同浓度的稀土 溶液中，蛋白质的终浓度为10nag·n】L～。一部分样品用于 直接测量，其它的样品首先冻千，然后加入适量重水(纯度 99％，AIrIre妨公司)，4℃氘代12h。再冻干，测试前将冻 nag·mL～。 干粉再溶于重水中，并使蛋白质终浓度为10 使用System1000型共聚焦显微拉曼光谱仪(Rdaishaw 公司)测量获得光谱。激发波长514．5nm，输出功率为4 牛血清白蛋白中共有18个酪氨酸，经计算这18个酪氨 300 酸都呈“暴露式”，即苯环上的OH基团是与溶剂Ro分子 mW，仪器分辨率4can～．扫描范围200～3can一，积分 形成氢键。稀土离子的加入没有改变酪氨酸的微环境。 时间为30s，于50倍镜头下测量，实验温度(18±1)℃，相 对湿度90％。 2．2色氨酸侧链在E一的作用下的结构变化 755 eraq归属于色氨酸吲哚环的对称呼吸振动”J。当稀 2结果与讨论 土离子浓度增大时，755crrlq处的谱峰强度增加。我们引入 1 448 crn-1处