稀土配合物时间分辨荧光探针的设计、合成与应用论文.pdfVIP

2006年l1月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 稀土配合物时间分辨荧光探针的设计、合成与应用 袁景利’1，一，王桂兰1，宋 波2，谭明乾2 (1．大连理工大学精细化工国家重点实验室，大连116012： 2．中科院大连化学物理研究所分析化学研究室，大连116023) 摘要：采用微乳液技术建立了几种粒径在25-55纳米的稀土荧光生物标记探针的可控制备、表 征、生物标记及其在时间分辨荧光生化测定中的应用技术．设计合成了三种单线态氧特异性稀土 配合物荧光探针，探讨了三种探针在化学体系、光化学体系、生物化学体系及活细胞体系中单线 态氧时间分辨荧光测定方面的应用。 关键词：稀土配合物；荧光探针；时间分辨荧光测定；生物标记；生物分析 稀土荧光生物探针及相关的时间分辨荧光生物分析技术近年来已经在各种生化测定中显示 出了越来越重要的作用。由于稀土荧光化合物具有超长的荧光寿命，可用于百微秒级的时间分辨 荧光测定，从而消除各种短寿命背景荧光对测定的干扰，非常适用于复杂系统中某些特定物质的 高灵敏度测定。本文主要介绍近年来我们在稀土荧光生物探针，特别是在纳米稀土荧光生物标记 探针及生物活性小分子单线态氧(102)的时间分辨荧光探针的研制与应用方面的一些研究进展 与结果。 l纳米稀土荧光生物标记探针的制备与应用 纳米级稀土荧光生物标记探针研究的主要目的是为了进一步提高稀土荧光生物标记探针的 检测灵敏度及光稳定性，同时克服“量子点”等纳米荧光生物标记探针使用中存在的背景荧光干 扰测定的问题。我们采用微乳液技术成功地建立了几种粒径在25．55纳米的硅胶基质搀杂型纳米 稀土荧光生物标记探针、表面带有活性氨基的搀杂型纳米稀土荧光生物标记探针、表面带有活性 氨基的共价键合型纳米稀土荧光生物标记探针及氧化钛、氧化锆基质的搀杂型纳米稀土荧光生物 标记探针的可控制各、表征、生物标记及其在时间分辨荧光免疫测定中的应用技术…。图1给出 了我们制备的3种内包稀土荧光化合物的硅胶纳米颗粒的透射电镜照片。 图1三种内包稀土荧光化舍物的硅胶纳米颗粒的透射电镜照片 2单线态氧特异性稀土配合物时间分辨荧光探针的镧备与应用 以将蒽或甲基葸基团与联Erie啶衍生物偶合为出发点，合成了三种新型功能性配位体 ’通讯联系人 18 2006年11月 第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集 湖北·武汉 衍生物则可与稀土离子(Eu3+、Tb3+)形成稳定的配合物。 三种荧光探针在紫外光激发 下仅可发出非常微弱的三价稀土 离子特征荧光，当探针与102反应 形成内氧化物后，其荧光显著增 强，并且具有超长的荧光寿命，适 用于数百微秒级的时间分辨荧光 测定。三种探针均具有非常好的水 溶性(可溶于各种缓冲溶液中)， 图2三种102特异性稀土配合物荧光探针的结构 高的化学稳定性(配合物稳定常数 (速率常数在109．10加M’l’s 1数量级)。使用三种探针分别测定了弱碱性条件下(pH=10．5) 根过氧化物酶催化的吲哚．3一乙酸氧化体系中产生的102，均得到良好的结果。将与光敏化剂 光敏化剂产生’02，采用时间分辨荧光成像模式对照射过程中的细胞进行荧光成像测定，实现了 对照射过程中细胞内产生的102的实时原位监控。 参考文献： et et 【1](a)M．Tana1．，Chem．Mater．，16，2494-2498(2004)；(b)Z．Ye et 13—51 et (2004)；(c)Z．Yea1．，Anal．Chem．，76，58(2004)；(d)X．Hal et et (2004)；(e)M．Tan a1．，Talu饥65， 206—21