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稻瘟病菌无毒基因AVR-Pil滩的精细定位
张连洪,燕继晔,彭友良
(中国农业大学植物病理学系,农业部分子植物病理学重点开放实验室北京100094)
无毒基因是病原菌中决定品种特异性的基因,其变异将产生病菌新小种、导
致对应作物品种抗病性的丧失,有时会引起作物病害大流行。因此,研究无毒基
因、把握其变异在监测病菌的时空动态、作物品种布局上有指导意义。虽然,有
关植物病原细菌无毒基因克隆的报道很多,但关于植物病原真菌无毒基因克隆的
报道却很少。为了通过图位法克隆稻瘟病菌无毒基因AVR.础m,本研究试图寻
找与该基因连锁的新标记,并构建与该基因连锁的分子标记间的物理图谱。
本室刘俊峰与张国珍等研究表明:稻瘟菌对水稻品种梅雨明(Pf矿)的无毒
性由一个无毒基因AVR中缈控制的。在此基础上,他们利用RAPD途径获得了
1.89cM,且两个标记位于目标基因的同一侧。
在上述基础上,作者根据稻瘟病菌数据分析,设计引物,筛选并获得了位于
目标基因另一侧的与AVR.只旷连锁的3个SSR标记。其中SSR50.24与目标无
两侧。
进一步通过染色体步移方法,得到了与SSR标记SSR50.24在同侧、但距离
距离分别为:4.86cM和1.89cM。
基因组TAC文库,获得了6个TAC阳性克隆。将这6个TAC阳性克隆构建重
100kb的TAC重叠群中。
于另一侧的RFLP标记,记为:11E22.6。这些结果表明:位于目标基因两侧的
重叠群中。
4
进一步的Southern杂交分析显示,上述3个标记均位于该重叠群中的一个
除和互补试验,期望尽快能完成彳隰A七m的克隆。
M她,一个新的ANK蛋白在稻瘟菌的菌丝生长
和致病性中起着重要作用
马星霞,彭友良
(中国农业大学植物病理学系,农业部分予植物病理学重点开放实验室北京100094)
锚蛋白重复序列(ANK,ankyrinrepeat)是在许多蛋白中含有的~种序列模
块,指相对保守的33个氨基酸的重复出现。这种模块首先在两个酵母细胞周期
了含有24个这种重复序列的结构,因此而得名。ANK蛋白质在生物体广泛存在,
从病毒、原核生物、真核生物到人体,从细胞核、细胞质到胞间质都有报道:在
结构域介导蛋白质与蛋白质相互作用,能够和多种配体结合,行使纷繁复杂的生
物功能。稻瘟菌中基因组中编码可能ANK蛋白的基因大约有51个,作者对其
中的一个基因MgAR2在稻瘟茵的生长、发育和致病性中的作用进行了研究。
梨孢菌中一个新的细胞周期调控蛋白为该菌产孢所必需
王维香,孙静, 彭友良
(中国农业大学农业部分子植物病理学实验室,北京100094)
由梨孢菌(Magnaporthegrisea)引起的水稻稻瘟病是世界水稻产区广泛发
生的的水稻病害,也是水稻病害中最重要的病害之一。梨孢菌的分生孢子由三个
细胞组成,平均每个分生孢子梗上着生8—10个分生孢子。该菌的分生孢子是侵
染水稻的主要初侵染源和再侵染源, 因此,研究梨孢菌的产孢调控的分子机理
具有重要的应用价值。
本文通过筛选稻瘟菌REMI转化体库,获得一个突变体$3514。该突变体与
野生型P131相比,其表型为:产孢量明显减少,其产孢量减少80%~85%;绝大
多数分生孢子梗只着生一个分生孢子;在洋葱表皮上,分生孢子萌发后生长出短
粗的分枝,但孢子萌发率、附着胞形成率和侵染钉形成率与野生型没有明显差异。
Blot
有性杂交和Southern印迹杂交结果表明,$3514的突变表型与潮霉素插入
标记共分离,插入质粒是单位点、单拷贝插入。
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