采用含原位聚合阴离子交换整体柱的微芯片分离氨基酸.pdfVIP

第34卷 分析化学(FENXIHuAxuE)研究报告 第l期 0f CllineseJoulTlal 43—46 2006年1月 AnalyticalCheⅢistry 采用含原位聚合阴离子交换整体柱的微芯片分离氨基酸 徐 溢“工 张 剑1 张晓凤3 徐平洲1 (重庆大学化学化工学院‘，光电技术及系统教育部重点实验室2，重庆40∞44) 3(重庆工学院生物工程学院，重庆400050) 摘要采用原位聚合法，制备了以2．甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(META)为功能单体的强碱性季钱盐 离子交换型微整体柱，构建了带微整体柱的复合式微流控芯片；以氨基酸一H：O：．Luminol化学发光体系为样品 对象，根据氨基骏等电点的差异，在原位聚合微整体拄上进行分离实验。进行了苯丙氨酸-白氨酸、苯丙氨酸一 组氨酸、苯丙氨酸一精氨酸3组氨基酸混合体系的分离，获得了很好的分离结果。优化并讨论了影响氨基酸分 离效果的多种因素，如缓冲液pH值、洗脱液pH值和洗脱液流速等。在优化条件下，苯丙氨酸-精氨酸的分离 度达到1．6，结果显示出整体柱与微流控体系相结合的可行性。 关键词原位聚合，阴离子交换型整体柱，氨基酸，微流控芯片 1引 言 随着微型全分析系统(灿．TAS)的快速发展，将进样、混合反应、分离富集、检测等集成到微小的芯片 上成为目前发展的趋势。其中，样品的分离富集涉及到很多现代分离技术，在实现分离缩微化过程的同 时，可减少试剂消耗量，提高分离效率…。整体柱(monoli山iccolumn)是近年发展起来的一种新型分离 介质，它通过反应试剂原位聚合而制得，具有制备简单、通透性好、可实现快速分离等优点，在高效液相 色谱“3和毛细管电色谱”3中已被广泛应用。将原位聚合制备整体柱技术与肛-TAs过程相匹配，在微流 控芯片上采用原位聚合制备整体柱实现固相萃取分离富集，已引起了人们的关注”，。目前利用微流控 芯片和整体柱分离模式来分离氨基酸的报道尚少。 本研究利用原位聚合法制备以2一甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(META)为功能单体的阴离子交 换型微整体柱，将其与微流控芯片相结合，组建成带有微整体柱的复合式微流控芯片。通过几组不同的 氨基酸作为样品体系，根据其等电点的差异，调节缓冲液pH值，在原位聚合制备的阴离子交换型微整 体柱上进行分离实验，进而讨论并优化了影响氨基酸分离效果的多种因素。实验进行了苯丙氨酸-白氨 酸、苯丙氨酸一组氨酸、苯丙氨酸一精氨酸三组氨基酸混合体系的分离。并利用氨基酸一H：0：·hminol化学 发光体系来检测分离效果。本研究探索了原位聚合法制备的微整体柱与微流控芯片的结合技术，以期 将其应用于微流控芯片上实现样品的分离富集等预处理过程的集成化。 2实验部分 2．1仪器和试剂 器(西安瑞迈电子科技有限公司)；KQ-50型超声波清洗器(昆山超声波仪器有限公司)。￡一苯丙氨酸 基酸厂)；鲁米诺(分析纯，nuka公司)。 2．2原位聚合阴离子交换型整体柱制备 按前期实验优化配比”’6o及制柱方法，原位聚合反应以2一甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(MElH) 2005-03-13收稿；2005描．25接受 本文系国家自然科学基金(No．903070i5和重庆市重点自然科学基金(No．8985)资助项日 分析化学 第34卷 混合，超声波振荡30 i．d×3 min后，将经过预处理的玻璃毛细管(400¨mcm)置于其中，于60ac的恒温 水浴中加热引发，反应4h后在玻璃微管内原位聚合形成微柱，从密闭试管中取出sPE微柱，室温老化 24 h，完成阴离子交换型微整体柱制备。 2．3带sPE微柱的复合式微流控芯片制作 cm×