选修一2-2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数概要1.ppt

孔隆教育 孔隆教育 课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 课程标准 测定某种微生物的数量。 课标解读 1.利用选择培养基分离细菌。 2.运用活菌计数法测定土壤中尿素细菌的数量。 1．筛选菌株 (1)自然界中目的菌株筛选的依据是根据它对 的要求，到相应的环境中去寻找。 (2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 或 其他微生物生长。 (3)选择培养基：在微生物学中，将允许 种类的微生物生长，同时 和 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 2．统计菌落数目 (1)常用方法： 法。 (2)统计依据：当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。 (3)平板选择菌落计数时一般选菌落数在 的平板，计数公式为 。 3．设置对照 (1)对照实验：是指除了 以外，其他条件都相同的实验。 (2)主要目的：排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验的可信度。例如为了确认培养基是否被杂菌污染，需以 培养基培养作为空白对照。 [思维激活1] 上述的对照组培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)是否也需接种？如何确认所制备的选择培养基的确起到了选择作用？ 提示　为确认培养基是否被杂菌污染时，对照组的牛肉膏蛋白胨培养基不需接种。欲确认所制备的选择培养基是否起到了选择作用，应同时对对照组的牛肉膏蛋白胨培养基进行接种——若对照组培养基中菌落种类明显复杂于实验组，则可确认选择培养基的确起到了选择作用。 1．选择培养基的制作方法 (1)在培养基全部营养成分具备的前提下，加入物质：依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长，如培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌。 (2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。 (3)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。 (4)通过某些特殊环境分离微生物：如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。 2．结果分析与评价 特别提示　(1)不同细菌的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面的特征不同，可以作为菌种鉴定的重要依据。 (2)进行活菌计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 (3)选择培养基一般只生长具有特定代谢特性的微生物，鉴别培养基可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。 【巩固1】 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题。 (1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入______作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基______(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用______法。 (2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于____________________；使用____________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是________________________________________________ ______________________________