抗微囊藻毒素单克隆抗体的研制-中国食品卫生杂志.pdf

论著 抗微囊藻毒素单克隆抗体的研制 李 　楠 　计 　融 　韩春卉 　江 　涛 　吴 　岩 ( 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所 ,北京 　10002 1) ( ) 摘 　要 :为研制抗微囊藻毒素 Microcystins ,简称 MC 的特异性单克隆抗体 ,用 MC - KLH 偶联物免疫 6～8 周龄雌性 BalBc 小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 Sp20 融合 ,经过 3～4 次亚克隆建立稳定分泌抗 MC 的杂交瘤细胞株 。将 杂交瘤细胞注射入BalBc 小鼠腹腔 ,生产出抗MC 的单克隆抗体 。得到了抗微囊藻毒素单克隆抗体细胞株 ,命名为 G5 ,抗体亚类为 IgG2a ,亲和力常数 29 ×10 - 11 molL ,分子量 150 KD ,加标回收率在 815 %～1250 %之间 ,与其他结 构类似物的交叉反应率 1 % 。筛选出的抗微囊藻毒素单克隆抗体具有较好的特异性 。 关键词 :海藻毒素类 ;酶联免疫吸附测定 ;抗体 ,单克隆 Preparation of Monoclonal Antibody Against Microcystins L I Nan , J I Rong , HAN Chunhui , J IAN G Tao , WU Yan (National Institute for Nutrition and Food Safety , Chinese CDC , Beij ing 10002 1 , China) Abstract : For development of monoclonal antibodies against Microcystin , a hybridoma cell line steadily secreting monoclonal antibodies against Microcystin , coded G5 , was obtained by fusing murine Sp20 cells with spleen cells from mice immunized with MCKLH conj ugate and subcloning for 3 to 4 cycles. The ascites containing monoclonal antibodies against MC was gained via inoculation of the hybridoma cells into the abdominal cavity of BalBc mice . The antibody subclass is IgG2a , affinity constant is 29 ×10 - 11 molL , molecular weight is 150 kD , recovery is 815 % ～ 1250 % , crossreaction 1 % 。The monoclonal antibodies thus prepared are highly sensitive and specific against microcystin . Key word : Lyngbya Toxins ; EnzymeLinked Immunosorbent Assay ; Antibodies , Monoclonal ( ) 　　微囊藻毒素 Microcystins ,简称 MC 是水体中蓝 术 。我们在单克隆抗体基础上建立了 EL ISA 检测方 藻爆发性繁殖产生的二级毒性代谢物 。MC 为肝毒 法 ,该法具有简单 、快速 、灵敏度高 、特异性高和可同 素 ,能在贻贝和扇贝的消化