第03章 基因组复制.pptVIP

一、腺病毒DNA的复制 腺病毒基因组结构 双链线性DNA 两端有反向末端重复序列（inverted terminal repeat，ITR） 复制 需要6种蛋白 病毒基因编码： DNA结合蛋白，前末端蛋白， DNA聚合酶pol 宿主细胞提供： 核因子I ，II ，III 复制过程 核因子I 、III、DNA结合蛋白结合到复制起点 ↓ 前末端蛋白（pTP）和聚合酶Pol形成的复合物与DNA结合 ↓ pTP上的dCMP-OH为引物起始DNA链的复制 ↓ 聚合酶Pol与pTP解离后结合到DBP分子上 ↓ pTP经过修饰变成TP留在新合成链的5 端 二、逆转录病毒基因组的复制 结构特点 两端有长末端重复序列（LTR），在LTR中有转录和复制的起始信号及引物的结合位点 复制过程 正链RNA病毒 ↓ 入侵细胞 ↓ 病毒的反转录酶将它反转录成DNA（原病毒） ↓ 宿主细胞的转录酶转录出RNA（以原病毒DNA为模板） 三、单链RNA病毒基因组的复制 结构特点 基因组较小 只编码A蛋白、外壳蛋白和复制酶等 分类 正链单链RNA病毒 负链单链RNA病毒 复制特点 ★复制正链：只需要复制酶 ★复制负链：以正链为模板，需要复制酶和宿主核 糖体蛋白S1、延伸因子EF-Tu和延伸 因子EF-Ts结合成全酶。 ★复制酶全酶对负链的亲和力大于对正链的亲和力，得到的正链总比负链多 ★正、负链只在复制酶工作的位置上结成双链 四、乙型肝炎病毒基因组复制 基因组结构特点 双链DNA 负链DNA为长链，呈环状但不闭合 正链是短链，长短不一 复制的特点 病毒侵入细胞延伸正链DNA到全长，成为双链DNA ↓ 以负链DNA为模板，转录出正链RNA ↓ 以正链RNA为模板，反转录出负链DNA ↓ 以负链DNA为模板，合成正链DNA ↓ 正链DNA将负链DNA桥联成环 二、 HBV的复制 dsDNA,不是通过半保留复制方式复制，通过反转录途径。①HBV?侵入人体后，与肝细胞膜上的受体结合，脱去包膜，穿入肝细胞质内，②然后脱去衣壳，部分双链环状DNA?进入肝细胞核内，③在宿主酶作用下，以负链DNA?为模板修正正链，形成共价闭合环状DNA?(ccc DNA)?，④以cccDNA?为模板，在宿主RNA?聚合酶II?的作用下，转录成几种不同长短的mRNA?，其中3.5kb?的mRNA?含有HBV?DNA?序列上全部遗传信息，称为前基因组RNA。 ⑤后者进入肝细胞质作为模板，在HBV?逆转录酶作用下，合成负链DNA；?⑥再以负链为模板，在HBV?聚合酶作用下，合成正链DNA，形成子代部分双链环状DNA，?装配成完整的HBV，释放至肝细胞外。⑦子代部分双链环状DNA?也可进入肝细胞核内，再形成cccDNA?并继续复制。cccDNA?半寿?(衰)?期长，很难从体内彻底清除 原核生物、真核生物、病毒等DNA复制知识点一览图 引物合成后，由DNA polⅢ（在真核细胞为DNA聚合酶?和?)催化，按碱基配对原则，将dNTP逐一添加到引物3’ 末端，形成磷酸二酯键，使新合成的链不断延长 二 复制的延长 DNA Pol P P + + dNTPs 5 ucgagcuag 3 agctcgatcgtagcctagcgtagcagtgcacgatc 5 catcggatcgcatcgtcacgtgctag 3 DNA子链的延伸小结： ??? 主要包括两个不同但相互有联系的事件，即前导链和随后链的合成。由DNA helicase解开双螺旋，由拓朴异构酶消除DNA链上的扭曲力，SSB结合使DNA单链稳定。 ??? 前导链的合成：由DnaG（primase）在复制起始位点附近合成一个10-60 nt的RNA引物，然后由polII把dNTP加到该引物上。??? 随后链的合成：产生Okazaki fragments，消除RNA引