2016内蒙古职校乳品分析与检验教案：项目十三 奶粉中乳糖的测定.docVIP

项目十三 奶粉中乳糖的测定 学习任务： 1.?查阅资料，总结奶粉中乳糖测定的原理和方法 2.?费林氏液的配制，乳糖标定费林氏液 3.?莱因-艾农氏法测奶粉中乳糖的含量 任务要求： 1.?查阅资料，总结测定奶粉中乳糖的原理和方法 2.?通过小组讨论并制定测定奶粉中乳糖的实验方案 3.?正确配制费林氏液并用乳糖进行标定 4.?正确测定奶粉中的乳糖含量 所需掌握知识点： 糖是多羟基醛或多羟基酮的化合物，从结构上可分为单糖，双糖和多糖。乳糖是哺乳动物特有的一种化合物，是一种双糖，本身具有还原性，水解生成一分子葡萄糖和一分子半乳糖。乳中糖类的99.8%以上是乳糖，此外还含有极少量的葡萄糖、果糖、半乳糖等。乳糖是人体非常有益的营养成分，它能促进人体肠道内有益乳酸菌的生长，抑制肠道内异常发酵造成的中毒现象，乳糖还可以促进机体对钙的吸收。在生产过程中，为了改变乳品的风味，提高乳品的甜度，蔗糖成为一种必不可少的添加物。蔗糖也是一种双糖，不具有还原性，水解后生成一分子葡萄糖和一分子果糖。一、乳粉中乳糖的测定（莱因—艾农氏法）1.?原理：样品经除去蛋白质以后，在加热条件下，费林甲、乙液等量混合，立即生成蓝色的沉淀，它立即与酒石酸钾钠反应，生成可溶性的深蓝色酒石酸钾钠络合物。在加热条件下，样液中的还原糖与酒石酸钾钠络合物反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，达到终点后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，显示出氧化亚铜沉淀的鲜红色。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。费林氏液由甲、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。平时甲、乙液分别贮存，测定时才等体积混合，混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钾钠反应，生成酒石酸钾钠与铜的络合物，使氢氧化铜溶解：弱氧化剂，故待二价铜全部被还原糖还原，过量一滴还原糖立即使次甲基蓝还原，溶液的蓝色即消失。反应终点应为氧化亚铜的砖红色。2.?试剂费林氏液：甲液：取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，稀释至500mL。乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500mL，静置两天后过滤。次甲基蓝溶液：10g/L。醋酸铅溶液：c(PbAc2)为200g/L。取20g醋酸铅，溶解于100mL蒸馏水中。草酸钾－磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g，溶解于100mL蒸馏水中。3.?仪器250mL三角瓶（蒸馏水洗净烘干）酸式滴定管(0~50mL、0.1mL精确度)250mL、100mL容量瓶5mL、50mL移液管电炉4.?操作步骤用乳糖标定费林氏液：称取预先在92~94烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g（准确到0.2mg?），用水溶解并稀释至250mL。将此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。预滴定：取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角瓶中。再加入20mL蒸馏水，从滴定管中放出15mL乳糖溶液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲基蓝溶液，继续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。精确滴定：另取费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比预备滴定量少0.5~1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基蓝溶液，然后继续滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。费林氏液的乳糖校正值（f1）： 式中：??A1——实测乳糖数，mg；V1——滴定时消耗乳糖液量，mL；m1——称取乳糖的质量，g。AL1——由乳糖液滴定毫升数查表-4-1所得的乳糖数，mg。乳糖的测定①样品处理称取2.5~3g样品（准确至0.01g），用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。加4mL醋酸铅、4mL草酸钾－磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤纸过滤，弃去最初25mL滤液后，所得滤液作滴定用。②滴定a)预滴定：将此滤液注入一个50mL滴定管中，待测定。取10mL费林氏液（甲、乙液各5mL）于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馏水，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，?加入3滴次甲基蓝。然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。b)精确滴定：另取10mL费林氏液（甲、乙各5mL）于250mL三角瓶中，再加入20mL蒸馏水，一次加入比预滴定量少0.5~1.0mL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基蓝溶