荧光法研究氢氯噻嗪与人血清白蛋白的相互作用 - 医学期刊.pdfVIP

( ) 第 32 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 12 期 2004 年 12 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1571～1574 荧光法研究氢氯噻嗪与人血清白蛋白的相互作用 徐文祥 　庞月红　双少敏 ( 山西大学化学化工学院 , 化学生物学与分子工程教育部重点实验室 ,太原 030006) ( ) ( ) 摘 　要 　采用荧光光度法研究了不同酸度下 ,降压利尿药氢氯噻嗪 Hydrochlorothiazide 与人血清白蛋白 HSA 间的相互作用。求得不同酸度下药物与人血清白蛋白相互作用的形成常数 ,讨论了微量金属离子对药物与血 清白蛋白形成常数的影响 ,并根据热力学常数确定了该药物与血清白蛋白之间的作用力类型 ,在此基础上依 据福斯特 F ? rster 非辐射能量转移机理探讨了氢氯噻嗪与人血清白蛋白相互结合时其给体受体间的距离和 能量转移效率。从而证实了氢氯噻嗪与人血清白蛋白结合作用为静态猝灭过程 ,且阐明了其猝灭机制是通过 能量转移产生的。 关键词 　氢氯噻嗪 ,人血清白蛋白 ,荧光猝灭 1 　引　　言 氢氯噻嗪是一种利尿及抗高血压药 ,可用于治疗多种类型的水肿及高血压症1 。人血清白蛋白 (HSA) 是人体中的药物输送蛋白 ,它能和许多内源性的物质广泛结合。生物体内存在着多种微量元素 和宏量元素 ,它们也参与许多重要的生命过程。因此研究药物、金属离子与血清白蛋白的相互作用一直 是当今生命科学、化学和临床医学研究中所共同关注的课题2 。而氢氯噻嗪与白蛋白及金属离子间的 相互作用尚未见报道。 实验研究了在不同酸度下 ,氢氯噻嗪与人血清白蛋白间的作用机制 , 以及温度、金属离子的存在对 结合常数的影响 ,并根据热力学常数确定了它们之间的主要作用力类型 ,依据 F ? rster 非辐射能量转移 机理求出了两者的结合位置。这对于阐明药物的运输过程及其在体内的作用机制具有一定的意义 ,为 药物合成、临床用药提供基础数据。 2 　实验部分 2 . 1 　仪器和试剂 ( ) ( ) F4500 型荧光分光光度计 日本日立公司 ; UV265 型紫外可见分光光度计 日本岛津公司 ; pH2 型酸度计( ) ( ) 上海雷磁分析仪器厂 ;501 型超级恒温器 上海市实验仪器厂 。 ( ) - 5 HSA 上海生物制品研究所 :用 0. 1mol/ L 的NaCl 配制 5 ×10 mol/ L 溶液备用 ,于 1～4 ℃冰箱中保 ( ) - 4 存。氢氯噻嗪 北京生物制品研究所 :用 0. 1 mol/ L 的NaCl 配制 5 ×10 mol/ L 储备液 ;0. 1 mol/ L 、pH = 5. 1 的NaH PO NaOH 缓冲溶液 ;0. 1 mol/ L 、pH = 7. 4 和pH = 8. 3 的 TrisHCl 缓冲溶液 ;其它试剂均为分析纯 ; 2 4 实验用水为石英亚沸二次蒸馏水。实验中NaCl 浓度均保持在 0. 1