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解剖科学进展 ProgressofAnatomicalSciences 2008，14(4)：372~376 TLR4参与脑缺血再灌注小鼠海马细胞凋亡 佟 月，高 音，张宝辉，刘玉丽，方秀斌 (中国医科大学神经生物学教研室，辽宁沈阳110001) 【摘要】 目的 探讨Toll样受体4(TLR4)在小鼠脑缺血再灌注损伤中对细胞凋亡的影响。方法 昆明小 鼠90只，随机分为：假手术组、缺血再灌注组、TLR4抗体阻断组，每组依据缺血后再灌注6h、12h、24h、48h、 72h不同时间点再分五个小组。采用免疫组织化学方法，Westernblot方法检~1]Caspase一3在各组海马不同再灌注时 间点的表达变化，应用TUNEL~检测海马细胞凋亡情况。结果 缺血再灌注组Caspase一3蛋白表达量和凋亡细胞 数明显高于假手术组 (pO．01)，而TLR4阻断~Caspase一3蛋白表达量和凋亡细胞数则明显少于缺血再灌注组 (p0．01)。结论 阻I~TLR4可减少脑缺血再灌注损伤中的细胞凋亡。 【关键词 】 Toll样受体4；脑缺血再灌注；细胞凋亡；细胞凋亡蛋白酶一3；海马；小鼠 【中图分类号】R322．81；R743．31 【文献标识码】A 【文章编号】1006—2947(2008)04—0372～05 TLR4isInvolved in theApoptosisofHippocampusCellsinCerebral Ischem ia——reperfusionM ice TONGYue，GAOYin，ZHANG Bao—hui，LIUYu—li，FANGXiu—bin (DepartmentofNeurobiology，ChinaMedicalUniversity，LiaoningShenyang110001China) 【Abstract】 objective TostudytheeffectofToll-likereceptor4ffLR4)ontheapoptosisincerebralischemia— reperfusion(I／R)mice．Methods 90kun-mingmicewererandomlydividedintoshamgroup，isehemia-reperfusiongroup andTLR4一blockedgroupindifferenttimepointsofreperfusion(6h，12h，24h，48hand72h)．Theexpressionofcaspase-3 wasstudiedbyimmunohistochemistryandWesternblot，theapoptotichippocampuscellswerestainedby TUNEL． Results Boththeexpressionofcaspase-3andthenumberofapoptosiscellsincreasedsignificantlyinI／Rgroupthanin shamgroup(p0．o1)．howevertheexpressionofcaspase-3andthenumberofapoptosiscellsdecreasedinTLR4-blocked groupcomparedwithIR／group(p0．O1)．Conclusion BlockingTLR-4candecreasethecellsapoptosiscausedby ischemia-reperfusion． 【Keywords】 Toll-likereceptor4；cerebralischemia-reperfusion；apoptosis；caspase-3；hippocampus；mouse 脑缺血再灌注损伤 (cerebralischemia—reperfusion 1 材料与方法 injury)是指脑缺血致脑细胞损伤，恢复血液再灌注 后，其缺血性损伤反而进一步加重的现象。目前研 1．