SSR标记在油菜隐性核不育杂交种的纯度鉴定研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sei．2012。40(11)：6376—6377 责任编辑 朱琼琼 责任校对 傅真治 SSR标记在油菜隐性核不育杂交种 的纯度鉴定研究 张宁洁，陈丽，朱文秀，曾章丽，王仙萍 (贵州省油菜研究所，贵州毒阳550001) 摘要 [目的]利用SSR标记对油菜隐性核不育杂交种的纯度进行鉴定。[方法]以贵州省油菜科学研究所选育的甘蓝型油菜 “油研 系 列”为材料。利用简化的SSR标记技术对制种样品进行纯度分析。[结果]筛选出了2对条带清晰、易于统计的SSR引物；大田生产F。杂 种群体的纯度鉴定结果表明，SSR鉴定的结果清晰可辨，可信度高，能较准确地反映种子的真实纯度。[结论]该试验为SSR标记在油菜 种子纯度鉴定中的进一步应用奠定 了基础。 关键词 甘蓝型油菜；杂交种亲本；杂交种纯度；SSR标记；引物筛选 中图分类号 S564．403．3 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2o12)11-06376一o2 HybridPurity Identification ofGenicM aleSterilebySSR ZHANGNing．jieetal (Gui~ouInstituteofOilCrops，Guiyang，Guizhou550001) Abstract [Objective]TheaimW88toidentifythehybridpurityofrapegenicmalesterilebySSRmakers．[Method]Toanalyzehtepurityofseed samplesbysimplifiedSSRmarkers．usingtheBrassicanapus “Yuyanseries’’asmaterialswhichhadbeennurturedbyGuizhouInstituteofOil Crops．[Result]2primerswereselectedaccordingtoPIC(polymorphisminformationcontent)valueandhteresultofFlpurityidentfiication， whichproducedinfield．showedthattheSSRmethod identifiedquicklyandeffectively，wouldprovideaccuratetechnicaldatafortllehybridesed purityidentification．[Conclusion]ItprepraedthegroundofrthefurtherapplicationofSSRmrakersinhtehybridseedpurityidentificationof rape· Keywords Brasswanapus；Parent；Hybridseedpurity；SSR mraker；Primersselecting 甘蓝型油菜杂交种的纯度是品种的生命线，是优 良品种 所油菜试验 田，待长至3叶期，在 田间选取幼嫩叶片，装于 增产潜力的主要影响因素。故及时、有效地检测杂交种中不 2．0ml离心管中，共取 400余株，一20qC保存，用粗提法 育母本植株的数量成为油菜杂交种纯度鉴定的关键。其鉴 (NaOH法)和精提法 (CTAB法)分别提取 4o个 叶片总 定方法有室外和室 内2种，室外鉴定方法是 ：在初花前必须 DNA。精提法具体步骤采取Murry等的方法 ，最后进行 DNA 对拔除母本行中可育株的及时陛与彻底性进行鉴定，’以进行 纯化，检测其浓度及质量，于 一20℃保存备用 ；DNA粗提法： 杂交种的纯度鉴定(以异地加代 田间鉴定为主)；目前室内鉴 取指甲大小的叶片，加入 100mlNaOH，100℃煮 1min，于 自 定可利用同工酶、种子贮藏蛋白、分子标记进行…。传统鉴 动磨样机上磨匀后加300 Tfis—HC1，摇匀 ，离心，取上清液 定的可靠性较差，对不发芽的种子和形态相近的材料难以提 作为 PCR模板。 供可靠证据进行区分，且对于某些杂交组合难以将其亲本与 r1．2．2 SSR技