褐飞虱吞蛋白的基因克隆、多克隆抗体制备及表达定位 - 昆虫学报.pdf

昆虫 学 报 褐飞虱吞蛋白的基因克隆多克隆抗体制备 及表达定位 俞叶微 许益鹏 赵晨星 韩善捷 安鹏 俞晓平 中国计量大学生命科学学院 浙江省生物计量与检验检疫重点实验室 杭州 摘要 目的探析吞蛋白 在褐飞虱 生长繁殖过程中的作用 方法 克隆褐飞虱吞蛋白基因并进行生物信息学分析在大肠杆菌 中诱导表达褐飞 虱吞蛋白基因融合蛋白经柱亲和层析法纯化后免疫新西兰兔子获得相应的多克隆抗体将所 得的抗体用于检测褐飞虱卵巢中吞蛋白的表达和定位 结果克隆得到褐飞虱两个吞蛋白基因 和 登录号分别为 和 分别 编码 个和 个氨基酸都含有吞蛋白典型的结构域和 结构域但它们在结构上存在 差异 和 检测结果表明制备的兔抗血清效价达 并表现出较好特异 性 将获得的抗体应用于免疫荧光实验表明 和蛋白在褐飞虱卵巢中普遍表达在卵 巢滤泡细胞的细胞间隙细胞膜细胞质中广泛分布而且与脂类物质的分布模式类似与正在侵入褐 飞虱卵巢的类酵母共生菌共定位 结论获得了褐飞虱吞蛋白基因和序列并明确 了其生物信息学特征成功制备了和多克隆抗体分析了和在褐飞虱 卵巢中的表达情况认为其可能与褐飞虱卵巢发育和成熟以及类酵母共生菌入侵褐飞虱卵巢有关 这些结果为进一步研究和在褐飞虱中的生物学功能奠定了基础 关键词 褐飞虱 吞蛋白 基因克隆 多克隆抗体 蛋白定位 卵巢 中图分类号 文献标识码 文章编号 基金项目 国家自然科学基金项目 浙江省自然科学基金项目 国家 计划项目 年度 浙江省育才工程项目 作者简介 俞叶微 女 年生 浙江台州人 硕士研究生 研究方向为褐飞虱分子生物学 许益鹏 男 年生 浙江温州人 博士 副教授 研究方向为褐飞虱及其共生菌的分子生物学 共同第一作者 通讯作者 收稿日期 接受日期 期 俞叶微等 褐飞虱吞蛋白的基因克隆多克隆抗体制备及表达定位