广州医科大学《临床免疫学检验》2.抗原抗体反应.pptVIP

广州医科大学《临床免疫学检验》2.抗原抗体反应.ppt

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本章内容 1.Principle of Ag-Ab reaction 2.Characteristics of Ag-Ab reaction 3.Influencing factors of Ag-Ab reaction 4.Types of Ag-Ab reaction 抗原抗体反应概念 抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。 抗原(antigen,Ag) 能够刺激机体免疫系统产生免疫应答,并能与免疫应答产物发生特异性结合的物质。 抗体(antibody, Ab) 机体的免疫系统受抗原物质刺激后,B细胞增殖分化为浆细胞所产生的一类能与抗原发生特异性结合的球蛋白。 抗原抗体反应形式 体内反应 体液免疫应答的效应作用(吞噬、溶菌、中和毒素等) 体外反应 肉眼可见或仪器可检测的反应(凝集反应、沉淀反应、标记免疫反应等) 体外抗原抗体反应也称血清学反应 (serological reaction) 第一节 抗原抗体反应的原理 物质基础: 抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性 抗原表位与抗体超变区密切接触 抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体 一、抗原抗体结合力:抗原抗体是非共价键结合,弱结合力 ●静电引力:是抗原抗体分子中带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互的引力,两个电荷距离越近,静电引力越大. ●范德华引力:抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力 . ●氢键结合力:供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力 ●疏水作用力:两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力. 结合力的强弱: 疏水作用力氢键结合力静电引力范德华引力 二、抗原抗体的亲和力与亲合力 1.亲和力(affinity):抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间的结合强度,是抗原抗体间固有的结合力 亲和力可用平衡常数K表示,K值越大,亲和力越高,与抗原结合也越牢固。 2.亲合力:是指一个抗体分子与抗原分子表面数个相应抗原表位之间的结合强度。 亲合力与抗体结合价相关(多价优势) 三、亲水胶体转化为疏水胶体 血清学反应条件下,抗原抗体均带负电荷,使极化的水分子在其周围形成水化层,成为亲水胶体 当抗原与抗体结合后,表面电荷减少,水化层变薄;而且由于抗原抗体复合物形成后,与水接触的表面积减少,由亲水胶体转化为疏水胶体 在电解质作用下,各疏水胶体之间靠拢,形成可见的抗原抗体复合物 亲水胶体转化为疏水胶体示意图 小结 抗原抗体结合反应的重要条件是抗原抗体之间特定部位的空间结构必须相互吻合,具有互补性; 其次,抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触,才能有足够的结合力使抗原抗体分子结合在一起。 抗体和大多数抗原在通常的血清学反应条件下均带负电荷,使极化的水分子在其周围形成水化层,成为亲水胶体。抗原抗体复合物成为疏水胶体。 在适当电解质、PH、温度等影响下,出现可见反应。 第二节 抗原抗体反应的特点 一、特异性(specificity) 抗原分子,只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能。 由抗原表位和抗体超变区之间空间结构的互补性决定的。 交叉反应仍是抗原抗体的特异性结合反应 交叉反应可影响血清学诊断的准确性 交叉反应可应用于临床诊断 如立克次体的脂多糖与变形杆菌某些菌株的O抗原有共同的抗原成分,故可用这类变形杆菌代替立克次体抗原与怀疑斑疹伤寒病人的血清做凝集试验,协助斑疹伤寒病的诊断,称为外-斐(Weil-Felix)试验. 二、比例性(proportionality) 比例性是指抗原与抗体发生可见反应需要遵循一定的量比关系,即两者的浓度和比例要合适。 等价带(equivalence)、最适比(optimal ratio)、带现象(zone phenomenon)、前带(prezone)、后带(postzone) 网格学说(latticetheory) Marrack(1934年)用网格学说解释了抗原抗体反应比例性的形成机制: 抗原大都是多价,抗体多为二价,等价带结合时,抗体的两个Fab段可分别与两个抗原分子表面的抗原表位结合,相互交叉连接成具有立体结构的巨大网格状聚集体,形成肉眼可见的反应物。 三、可逆性(reversibility) 是指抗原与抗体结合成复合物后,在一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性 解离后抗原抗体仍保持原有特性 解离因素: 一是抗体对应抗原的亲合力; 二是环境因素(pH、离子强度等) 对复合物的影响 四、阶段性 第一阶段:抗原抗体发生特异性结合阶段,反应快(数秒至数分钟)、肉眼不可见 第二

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